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背景:环氧化酶2、聚蛋白多糖酶1和胰岛素样生长因子1参与关节软骨病理损伤过程。目的:观察携带基因环氧化酶2、聚蛋白多糖酶1的shRNA干扰载体和携带胰岛素样生长因子1的过表达慢病毒载体在骨髓间充质干细胞中的表达情况。方法:应用重组慢病毒技术构建携带沉默基因环氧化酶2、聚蛋白多糖酶1、过表达基因胰岛素样生长因子1和绿色荧光蛋白基因的重组慢病毒表达载体,并用其转染体外培养的第3代人骨髓间充质干细胞(实验组),并以无目的基因的慢病毒载体转染人骨髓间充质干细胞和未做处理的人骨髓间充质干细胞分别作为阴性对照组和空白组。结果与结论:环氧化酶2和聚蛋白多糖酶1在转染重组慢病毒的人骨髓间充质干细胞中的 mRNA 和蛋白水平有受到了明显抑制,胰岛素样生长因子1 mRNA和蛋白表达水平则明显上升。说明应用慢病毒可在人骨髓间充质干细胞成功沉默环氧化酶2和聚蛋白多糖酶1基因,同时将胰岛素样生长因子1高表达,为系统性治疗关节炎提供基因治疗的基础。
作者:袁钰祺;张海宁;孔霞;隋爱华;王英振
来源:中国组织工程研究 2015 年 10期
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