背景：骨膜细胞已被应用于骨缺损及修复，但其可否在成骨诱导环境中与髓核细胞共培养向成骨分化，并应用于椎间隙骨性融合的相关研究报道较少。<br> 目的：分离培养髓核细胞与骨膜细胞，观察特定环境下髓核细胞的成骨潜能，以及加入骨膜细胞与其共培养后的成骨能力。<br> 方法：Ⅱ型胶原酶消化离心贴壁法分离兔髓核细胞；组织贴壁培养法分离兔骨膜细胞。采用细胞表面抗原CD90、CD105免疫荧光染色法鉴定骨膜细胞，甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学鉴定髓核细胞。实验分为两组：成骨诱导环境单独培养的髓核细胞为对照组，加入骨膜细胞与髓核细胞共培养为实验组。CCK8法检测细胞增殖，分别行碱性磷酸酶、茜素红染色、Ⅰ型胶原免疫组织化学染色进行成骨鉴定，Western blot检测两组细胞成骨诱导后骨桥蛋白的表达。<br> 结果与结论：骨膜细胞表面抗原CD90、CD105呈阳性，髓核细胞甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原染色阳性；1，3，5，7，9 d各时间点实验组髓核细胞增殖活性显著高于对照组；诱导2周后2组细胞碱性磷酸酶染色、茜素红染色及Ⅰ型胶原免疫组织化学染色均为阳性，但实验组阳性表达高于对照组(P<0.05)；实验组骨桥蛋白表达强于对照组。髓核细胞具有成骨分化的潜能，但体外的增殖能力较低，加入骨膜
作者：杨宇明；袁峰；陆海涛；张峻伟；盛晓磊；李智多
来源：中国组织工程研究 2015 年 37期
