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背景:研究表明,miRNA 对肿瘤干细胞的更新分化有调节作用,有关 miRNA-17-92在胃癌干细胞更新及增殖中的作用尚未完全阐明。<br>  目的:分析miRNA-17-92在胃癌干细胞自我更新及增殖中的作用。<br>  方法:①利用细胞培养使胃癌干细胞贴壁分化并送miRNA芯片检测,寻找并验证不断缺失的miRNA。②构建并转染miRNA-17-92分子慢病毒稳定转染细胞。③通过tumorsphere实验研究miRNA-17-92与胃癌细胞更新的关系。④通过MTT、平板克隆试验检测miRNA-17-92与胃癌干细胞增殖的关系。<br>  结果与结论:①miR-19b/20a/92a在胃癌干细胞贴壁分化过程中表达逐渐减低。②慢病毒携带的miRNA-17-19基因在MKN28细胞和CD44-/EpCAM-细胞中的表达均明显增加;瞬时转染pre-miR-19b/20a/92a能使CD44-/EpCAM-和MKN28的miRNA表达增高,瞬时转染pre-miR-19b/20a/92a拮抗剂能使SGC7901和CD44+/EpCAM+的miRNA表达降低;过表达lenti-miR-19b/20a/92a能显著增加胃癌细胞形成肿瘤球的能力;在化疗药的作用下,lenti-miR-19b/20a/92a感染细胞的生存时间延长;瞬时转染pre-miR-19b/20a/92a 能够显著增加CD44+/EpCAM+细胞数,转染其拮抗剂可以降低CD44+/EpCAM+细胞数。③miR-19b/20a/92a稳定表达组的胃癌细胞增殖速度较对照组快。瞬

作者:宋子正;杨华;商琰红;刘斌;张刚;王华;臧爱民

来源:中国组织工程研究 2015 年 50期

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作者:
宋子正;杨华;商琰红;刘斌;张刚;王华;臧爱民
来源:
中国组织工程研究 2015 年 50期
标签:
干细胞 肿瘤干细胞 胃癌 miR-17-92 增殖 更新 Stomach Neoplasms Neoplastic Stem Cels MicroRNAs Cel Proliferation Tissue Engineering
背景:研究表明,miRNA 对肿瘤干细胞的更新分化有调节作用,有关 miRNA-17-92在胃癌干细胞更新及增殖中的作用尚未完全阐明。<br>  目的:分析miRNA-17-92在胃癌干细胞自我更新及增殖中的作用。<br>  方法:①利用细胞培养使胃癌干细胞贴壁分化并送miRNA芯片检测,寻找并验证不断缺失的miRNA。②构建并转染miRNA-17-92分子慢病毒稳定转染细胞。③通过tumorsphere实验研究miRNA-17-92与胃癌细胞更新的关系。④通过MTT、平板克隆试验检测miRNA-17-92与胃癌干细胞增殖的关系。<br>  结果与结论:①miR-19b/20a/92a在胃癌干细胞贴壁分化过程中表达逐渐减低。②慢病毒携带的miRNA-17-19基因在MKN28细胞和CD44-/EpCAM-细胞中的表达均明显增加;瞬时转染pre-miR-19b/20a/92a能使CD44-/EpCAM-和MKN28的miRNA表达增高,瞬时转染pre-miR-19b/20a/92a拮抗剂能使SGC7901和CD44+/EpCAM+的miRNA表达降低;过表达lenti-miR-19b/20a/92a能显著增加胃癌细胞形成肿瘤球的能力;在化疗药的作用下,lenti-miR-19b/20a/92a感染细胞的生存时间延长;瞬时转染pre-miR-19b/20a/92a 能够显著增加CD44+/EpCAM+细胞数,转染其拮抗剂可以降低CD44+/EpCAM+细胞数。③miR-19b/20a/92a稳定表达组的胃癌细胞增殖速度较对照组快。瞬