背景：目前临床上尚未发现完全治愈脊髓损伤，使其达到结构及功能恢复的治疗方法。已有的神经营养因子治疗方法促进神经细胞再生的效果有限，而干细胞移植治疗可能是现阶段修复脊髓损伤的有效方法之一。<br> 目的：无血清悬浮分离培养法培养胎鼠脊髓源性神经干细胞，采用形态学、免疫荧光技术和多向分化能力进行神经干细胞鉴定。<br> 方法：应用悬浮分离培养法，培养纯化孕13.5 d C57BL/6胎鼠的脊髓源性神经干细胞。倒置显微镜观察细胞形态学变化；CCK-8法检测细胞的增殖能力。免疫荧光技术检测Nestin和Sox2表达；使用自然分化法验证第4代脊髓源性神经干细胞多向分化特性，明确其分化能力。<br> 结果与结论：采用无血清悬浮分离培养法可以顺利获取脊髓源性神经干细胞。培养的脊髓源性神经干细胞增殖活性良好，高表达Nestin和Sox2，且两种标记物与DAPI核染高度均匀吻合，说明细胞纯度高。进一步诱导分化显示，细胞可以向GFAP和Tuj1阳性细胞分化，证明脊髓源性神经干细胞分化潜能较好。该实验可建立一套体外培养脊髓源性神经干细胞分离、培养、纯化及鉴定体系，为后续神经干细胞的应用研究奠定基础。
作者：李军；徐大波；付强；刘彦斌
来源：中国组织工程研究 2015 年 50期
