背景:有效分离干细胞是前列腺癌发生发展研究的基础,目前的主流方法是免疫磁珠分选。目的:应用自制的免疫磁珠分选前列腺肿瘤组织中的 CD133+/CD44+细胞,并进一步培养和传代进行免疫学鉴定,以确定免疫磁珠分选效果。方法:应用独创的磁珠制备免疫磁珠,分选肿瘤组织中细胞膜表达CD133和CD44的细胞。观察分选细胞无血清培养成球情况,及传代后其在形态学、增殖能力方面与标准肿瘤细胞株的差异,并用免疫荧光法检测其特异性抗体的表达。结果与结论:制备的免疫磁珠粒径小、分选效果佳。分选的细胞成球效果好,培养传代后的细胞依旧明显表达CD133和CD44抗原。分选的细胞非诱导培养后可见多种形态,生长旺盛。转化生长因子β诱导培养后细胞形态较单一且生长缓慢。两组细胞与标准肿瘤细胞株培养后的增殖情况差异均有显著性意义(P <0.05)。结果表明应用自制免疫磁珠从肿瘤细胞中分选的 CD133+/CD44+细胞经过初步形态及功能鉴定具有干细胞的特性,可为前列腺癌干细胞的提取及进一步培养研究奠定基础。
作者:龚锐;李胜英;霍志霞;丁浩;孙二琳
来源:中国组织工程研究 2016 年 20卷 1期