背景:Sema7A 是一种细胞表面蛋白,它可以促进破骨细胞的融合同时促进成骨细胞的迁移,从而影响骨的动态平衡。推测,Sema7A siRNA可能减弱钛微粒成骨细胞分化。目的:分析信号素7A(Sema7A)对钛颗粒抑制鼠MC3T3-E1前成骨细胞活性过程的影响。方法:取第六七代生长状态良好的小鼠颅骨前成骨细胞(MC3T3-E1),分为4组培养。其中空白对照组为单独培养的细胞;标准对照组加入了钛微粒共培养;实验1组加入 Sema7A 过表达质粒,实验2组加入Sema7AsiRNA进行干扰。采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Q-PCR检测骨涎蛋白、骨钙素、Ⅰ型胶原蛋白的mRNA表达情况;Western-blot检测骨涎蛋白、骨钙素、Ⅰ型胶原蛋白的蛋白表达情况;茜素红钙结节染色检测成骨细胞的矿化程度。结果与结论:结果提示标准对照组、实验1组检测到骨涎蛋白、骨钙素、Ⅰ型胶原蛋白表达明显减少而实验2组骨涎蛋白、骨钙素、Ⅰ型胶原蛋白则比标准对照组表达增加(P <0.05)。流式细胞仪结果提示实验1组成骨细胞凋亡率明显高于其他组(P <0.05),而实验2组则比标准对照组凋亡率降低(P <0.05)。茜素红染色检测结果显示实验1组未见明显的矿化结节,实验2组有矿化结节形成。结果表明通过基因干扰技术抑制Sema7A活性可以对钛颗粒抑制鼠MC3T3-E1成骨细胞分
作者:丛宇;茹江英;赵云龙;俞磊;包倪荣;许斌;赵建宁
来源:中国组织工程研究 2016 年 2期