背景:为改善聚乳酸的细胞亲和性,前期实验在其表面加入骨形态发生蛋白7功能基团,制备了经骨形态发生蛋白成骨预处理的聚乳酸三维支架.目的:验证经骨形态发生蛋白成骨预处理聚乳酸三维支架与骨膜来源细胞的相容性.方法:取传至3代后成骨诱导分化的人骨膜来源细胞,实验组以1×109 L-1的细胞浓度接种于含聚乳酸支架的培养板内,聚乳酸支架预先经含骨形态发生蛋白7的成骨诱导培养液浸泡24 h;对照组直接以1×109 L-1的细胞浓度接种于培养板内.培养后1,3,5,7,9,11d,采用CCK-8法检测细胞增殖能力;培养后3,6,9,12d,电镜下观察细胞-支架复合体.结果与结论:①细胞增殖结果:两组细胞生长曲线均呈“S”型,实验组对数生长期细胞增殖较快,平稳期细胞数目明显下降,对照组平稳期细胞数目继续上升.②透射电镜观察结果:复合培养3-6 d时,支架表面细胞黏附数量逐渐增多,细胞生物状态良好,细胞器旺盛,至第9天,开始出现细胞老化及凋亡.③扫描电镜观察结果:复合培养3-9 d时,支架表面细胞黏附数量逐渐增多,增殖旺盛,至12d时见凋亡细胞.④结果表明,经骨形态发生蛋白成骨预处理聚乳酸三维支架具有良好的细胞相容性,其与细胞复合培养1周为较佳的体外复合培养时间.
作者:贝抗胜;刘延晓;熊英辉;吴礼杨;卢林俊
来源:中国组织工程研究 2016 年 20卷 3期