背景:MicroRNAs在椎间盘退变的疾病中起重要作用,缺氧诱导因子缺失可加速椎间盘的退变。<br> 目的:检测缺氧诱导因子1α后小鼠椎间盘内microRNAs的变化情况,探究microRNAs与椎间盘退变的关系及缺氧诱导因子1α调控椎间盘退变机制和通路。<br> 方法:通过前期构建的条件性敲除髓核细胞缺氧诱导因子1α基因的小鼠,分别取基因敲除组与正常对照组4周龄小鼠的椎间盘组织进行组织学染色观察;通过提取标本的总RNAs,从中分离microRNAs,荧光标记后与微阵列芯片杂交,扫描检测后数据经分析处理,筛选椎间盘组织中microRNA差异表达谱。采用实时荧光定量RT-PCR技术验证在椎间盘组织中均存在显著差异表达的microRNAs。分析差异表达microRNAs的靶基因及通路,预测其在椎间盘退变中的作用。<br> 结果与结论:缺氧诱导因子1α基因缺失小鼠椎间盘髓核细胞数量减少,细胞形态变小,细胞质着色加深;两组小鼠椎间盘中的microRNAs的芯片筛选结果中,10个microRNAs发生了明显的差异表达,其中有7个microRNAs发生上调,3个microRNAs发生下调。结果提示缺氧诱导因子1α缺失后可能引起某些重要的microRNAs调节失衡,引起椎间盘髓核细胞大量的死亡,加速椎间盘的退变。
作者:孟祥超;刘卓超;王君;周琦;齐进;张兴凯
来源:中国组织工程研究 2016 年 20卷 7期