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背景:研究表明,纳米级超声对比剂具有较强的穿透能力,使血管外靶组织显像成为可能,超越了微米级对比剂仅能发生血池内显像的局限性。<br>  目的:构建叶酸修饰的乳腺癌靶向纳米超声造影微粒,评估其与细胞靶向结合的能力及体外超声成像效果。<br>  方法:采用超声乳化-蒸发法制备对比剂聚乙二醇化乳酸羟基乙酸共聚物包裹液态氟碳的纳米粒(记为mPP/PFOB)和叶酸修饰的聚乙二醇化乳酸羟基乙酸共聚物包裹液态氟碳的纳米粒(记为mPPF/PFOB)。①生物相容性检测:取对数生长期的人皮肤成纤维细胞HFF-1、人乳腺癌MCF-7细胞,分别加入0,0.005,0.01,0.02,0.05,0.1,0.2,1 g/L的mPP/PFOB或mPPF/PFOB,培养24 h后检测细胞活力。②体外寻靶能力检测:取对数生长期的HFF-1、MCF-7细胞,均分3组干预,A、B组分别加入Cy5标记的mPP/PFOB与mPPF/PFOB,C组在加入Cy5标记的mPP/PFOB前以叶酸处理2 h,培养0.5 h后,流式细胞仪检测荧光强度;培养20 min后,共聚焦显微镜观察对比剂在细胞中的分布。③体外超声显影:实验分3组,A组为生理盐水,B组制备 mPPF/PFOB纳米粒与生理盐水混悬液,C组以 mPPF/PFOB纳米粒与生理盐水混悬液重悬MCF-7细胞沉淀,制备纳米粒与细胞混悬液,将3种液体加入乳胶手套中扎紧,采用超声

作者:陈园园;徐枫;杨辉;刘婷;周建桥;蔡晨蕾;叶园园;刘培峰;韩宝三

来源:中国组织工程研究 2016 年 20卷 30期

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陈园园;徐枫;杨辉;刘婷;周建桥;蔡晨蕾;叶园园;刘培峰;韩宝三
来源:
中国组织工程研究 2016 年 20卷 30期
标签:
生物材料 纳米材料 纳米粒 聚乙二醇 聚乳酸-羟基乙酸共聚物 叶酸受体 超声诊断 靶向对比剂 乳腺癌 国家自然科学基金
背景:研究表明,纳米级超声对比剂具有较强的穿透能力,使血管外靶组织显像成为可能,超越了微米级对比剂仅能发生血池内显像的局限性。<br>  目的:构建叶酸修饰的乳腺癌靶向纳米超声造影微粒,评估其与细胞靶向结合的能力及体外超声成像效果。<br>  方法:采用超声乳化-蒸发法制备对比剂聚乙二醇化乳酸羟基乙酸共聚物包裹液态氟碳的纳米粒(记为mPP/PFOB)和叶酸修饰的聚乙二醇化乳酸羟基乙酸共聚物包裹液态氟碳的纳米粒(记为mPPF/PFOB)。①生物相容性检测:取对数生长期的人皮肤成纤维细胞HFF-1、人乳腺癌MCF-7细胞,分别加入0,0.005,0.01,0.02,0.05,0.1,0.2,1 g/L的mPP/PFOB或mPPF/PFOB,培养24 h后检测细胞活力。②体外寻靶能力检测:取对数生长期的HFF-1、MCF-7细胞,均分3组干预,A、B组分别加入Cy5标记的mPP/PFOB与mPPF/PFOB,C组在加入Cy5标记的mPP/PFOB前以叶酸处理2 h,培养0.5 h后,流式细胞仪检测荧光强度;培养20 min后,共聚焦显微镜观察对比剂在细胞中的分布。③体外超声显影:实验分3组,A组为生理盐水,B组制备 mPPF/PFOB纳米粒与生理盐水混悬液,C组以 mPPF/PFOB纳米粒与生理盐水混悬液重悬MCF-7细胞沉淀,制备纳米粒与细胞混悬液,将3种液体加入乳胶手套中扎紧,采用超声