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背景:为解决骨髓间充质干细胞体内分化效率低的问题,拟联合Shootin1基因修饰,希望能有效提高脊髓损伤区内骨髓间充质干细胞神经分化的能力,增加细胞移植治疗脊髓损伤的效果。<br>  目的:探讨过表达Shootin1的骨髓间充质干细胞移植修复脊髓损伤模型大鼠的神经再生能力。<br>  方法:①通过腺病毒转染48 h,使骨髓间充质干细胞过表达Shootin1;②在体外进行神经诱导分化,免疫荧光检测神经巢蛋白(Nestin)与神经元特异性核蛋白(NeuN)的表达;③运用改良Al en 撞击装置制备脊髓撞击损伤模型,造模后半小时在蛛网膜下腔注射Shootin1转染的骨髓间充质干细胞和未转染骨髓间充质干细胞,脊髓损伤对照组仅进行脊髓损伤手术。脊髓损伤5周后取脊髓样本进行冰冻切片检测神经相关标记。结果与结论:①腺病毒转染48 h,免疫荧光与Western Blot检测骨髓间充质干细胞内已成功表达Shootin1蛋白;②体外神经诱导分化7 d,3组细胞形态上均发生了变化,Shootin1转染的骨髓间充质干细胞组和未转染骨髓间充质干细胞组Nestin与NeuN的表达差异不明显;③脊髓撞击损伤大鼠体内实验发现,与对照组相比,细胞移植组BBB评分增高。移植Shootin1转染的骨髓间充质干细胞组和未转染骨髓间充质干细胞组均有Nestin,NeuN,GFAP,MA

作者:张伟;朱肖奇;张德才

来源:中国组织工程研究 2016 年 20卷 50期

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作者:
张伟;朱肖奇;张德才
来源:
中国组织工程研究 2016 年 20卷 50期
标签:
干细胞 移植 脊髓损伤 骨髓间充质干细胞 Shootin1 神经再生
背景:为解决骨髓间充质干细胞体内分化效率低的问题,拟联合Shootin1基因修饰,希望能有效提高脊髓损伤区内骨髓间充质干细胞神经分化的能力,增加细胞移植治疗脊髓损伤的效果。<br>  目的:探讨过表达Shootin1的骨髓间充质干细胞移植修复脊髓损伤模型大鼠的神经再生能力。<br>  方法:①通过腺病毒转染48 h,使骨髓间充质干细胞过表达Shootin1;②在体外进行神经诱导分化,免疫荧光检测神经巢蛋白(Nestin)与神经元特异性核蛋白(NeuN)的表达;③运用改良Al en 撞击装置制备脊髓撞击损伤模型,造模后半小时在蛛网膜下腔注射Shootin1转染的骨髓间充质干细胞和未转染骨髓间充质干细胞,脊髓损伤对照组仅进行脊髓损伤手术。脊髓损伤5周后取脊髓样本进行冰冻切片检测神经相关标记。结果与结论:①腺病毒转染48 h,免疫荧光与Western Blot检测骨髓间充质干细胞内已成功表达Shootin1蛋白;②体外神经诱导分化7 d,3组细胞形态上均发生了变化,Shootin1转染的骨髓间充质干细胞组和未转染骨髓间充质干细胞组Nestin与NeuN的表达差异不明显;③脊髓撞击损伤大鼠体内实验发现,与对照组相比,细胞移植组BBB评分增高。移植Shootin1转染的骨髓间充质干细胞组和未转染骨髓间充质干细胞组均有Nestin,NeuN,GFAP,MA