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背景:前期研究发现,黄精多糖通过Wnt/β-catenin信号通路促进骨髓间充质干细胞成骨分化,但是其促进骨髓间充质干细胞成骨分化的作用及分子机制尚不明确。<br>  目的:探讨黄精多糖LRP5激活Wnt信号通路促进小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的研究。<br>  方法:培养C57BL/6小鼠骨髓骨髓间充干细胞,构建LRP5干扰载体,转染C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞,转染后在荧光倒置显微镜下计算细胞荧光转染效率及Western Blot 检测LRP5蛋白的表达。碱性磷酸酶、茜素红染色和Western Blot分析转染LRP5-siRNA病毒后小鼠骨髓间充质干细胞成骨能力的改变;RT-PCR及双荧光素酶检测黄精多糖对沉默LRP5的小鼠骨髓间充干细胞的成骨分化作用。<br>  结果与结论:①与对照组相比,LRP5转染组细胞显著降低细胞的矿化能力(P<0.05),明显降低Osterix、Runx2基因及LRP5蛋白的表达(P<0.05);②黄精多糖能促进转染LRP5-siRNA病毒的小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,能显著上调β-catenin及Osterix基因的表达(P<0.05),促使含有 TCF 结合位点的荧光素酶报告基因(TOPFlash)的高表达(P<0.05);③结果说明,LRP5在小鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化过程中有重要作用。黄精多糖不依赖于LRP5激活 Wnt/β-catenin 信号通路促

作者:彭小明;宗少晖;曾高峰;农梦妮;杜力;李珂珂;何基琛;施雄智;吴云乐

来源:中国组织工程研究 2017 年 21卷 4期

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作者:
彭小明;宗少晖;曾高峰;农梦妮;杜力;李珂珂;何基琛;施雄智;吴云乐
来源:
中国组织工程研究 2017 年 21卷 4期
标签:
组织构建 骨细胞 黄精多糖 骨髓间充质干细胞 成骨分化 Wnt/β-catenin通路 病毒转染 国家自然科学基金
背景:前期研究发现,黄精多糖通过Wnt/β-catenin信号通路促进骨髓间充质干细胞成骨分化,但是其促进骨髓间充质干细胞成骨分化的作用及分子机制尚不明确。<br>  目的:探讨黄精多糖LRP5激活Wnt信号通路促进小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的研究。<br>  方法:培养C57BL/6小鼠骨髓骨髓间充干细胞,构建LRP5干扰载体,转染C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞,转染后在荧光倒置显微镜下计算细胞荧光转染效率及Western Blot 检测LRP5蛋白的表达。碱性磷酸酶、茜素红染色和Western Blot分析转染LRP5-siRNA病毒后小鼠骨髓间充质干细胞成骨能力的改变;RT-PCR及双荧光素酶检测黄精多糖对沉默LRP5的小鼠骨髓间充干细胞的成骨分化作用。<br>  结果与结论:①与对照组相比,LRP5转染组细胞显著降低细胞的矿化能力(P<0.05),明显降低Osterix、Runx2基因及LRP5蛋白的表达(P<0.05);②黄精多糖能促进转染LRP5-siRNA病毒的小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,能显著上调β-catenin及Osterix基因的表达(P<0.05),促使含有 TCF 结合位点的荧光素酶报告基因(TOPFlash)的高表达(P<0.05);③结果说明,LRP5在小鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化过程中有重要作用。黄精多糖不依赖于LRP5激活 Wnt/β-catenin 信号通路促