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背景:由于中枢神经系统疾病研究需求,实验室常用有毒性的阿糖胞苷获得纯度较高的神经元细胞,然而阿糖胞苷的介入时间鲜见研究.目的:验证终浓度为10μmol/L阿糖胞苷在大鼠皮质神经元原代细胞培养中的适宜介入时间.方法:采用神经元专用培养基Neurobasal+B27进行大脑皮质组织原代神经元培养,分别于接种细胞后12,24,36,48 h加入终浓度为10μmol/L阿糖胞苷.每48 h半量换液.于7 d后倒置的显微镜下观察神经元形态;采用免疫细胞化学的方法对神经元特异性烯醇化酶进行免疫化学染色,鉴定神经元细胞的纯度和成熟度;计算机多功能图像分析系统对所有神经元特异性烯醇化酶阳性细胞进行形态学计量分析.结果与结论:①接种细胞后24 h加入阿糖胞苷,神经元纯度在90

作者:关宏;潘学峰;刘昊坤;刘小青;张丽娜;王少毅;董晓东;牛嗣云

来源:中国组织工程研究 2017 年 21卷 12期

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作者:
关宏;潘学峰;刘昊坤;刘小青;张丽娜;王少毅;董晓东;牛嗣云
来源:
中国组织工程研究 2017 年 21卷 12期
标签:
组织构建 组织工程 阿糖胞苷 神经元培养 神经元纯度 国家自然科学基金
背景:由于中枢神经系统疾病研究需求,实验室常用有毒性的阿糖胞苷获得纯度较高的神经元细胞,然而阿糖胞苷的介入时间鲜见研究.目的:验证终浓度为10μmol/L阿糖胞苷在大鼠皮质神经元原代细胞培养中的适宜介入时间.方法:采用神经元专用培养基Neurobasal+B27进行大脑皮质组织原代神经元培养,分别于接种细胞后12,24,36,48 h加入终浓度为10μmol/L阿糖胞苷.每48 h半量换液.于7 d后倒置的显微镜下观察神经元形态;采用免疫细胞化学的方法对神经元特异性烯醇化酶进行免疫化学染色,鉴定神经元细胞的纯度和成熟度;计算机多功能图像分析系统对所有神经元特异性烯醇化酶阳性细胞进行形态学计量分析.结果与结论:①接种细胞后24 h加入阿糖胞苷,神经元纯度在90