背景:前期研究表明,晚期糖基化终末产物与兔软骨细胞共同孵育后,肿瘤坏死因子 α 和基质金属蛋白酶13等炎性因子与基质降解因子表达明显增多.然而,晚期糖基化终末产物致软骨细胞损伤的机制远未阐明.目的:观察晚期糖基化终末产物对人关节软骨细胞炎性因子与基质降解因子表达及核因子KB活化水平的影响,初步探讨晚期糖基化终末产物诱软骨细胞损伤的潜在机制.方法:运用机械分离与两步酶顺序消化法分离培养人软骨细胞,并用Ⅱ型胶原免疫组织化学染色以及细胞免疫荧光对人软骨细胞进行鉴定.采用不同质量浓度晚期糖基化终末产物(1,10,25,50,100 mg/L)干预人软骨细胞;并以正常人软骨细胞及BSA干预为对照,24 h后采用Real-time PCR及Western blot检测肿瘤坏死因子 α、基质金属蛋白酶13、白细胞介素1三者的mRNA及蛋白表达水平,采用Western blot检测人软骨细胞胞浆中IKBα 及胞核中核因子 κB p65的含量.结果与结论:①与对照组比较,晚期糖基化终末产物可浓度依赖性地诱导人关节软骨细胞肿瘤坏死因子 α、基质金属蛋白酶13、白细胞介素1α、白细胞介素1β 表达增多,且以100 mg/L组作用最明显;②晚期糖基化终末产物处理组中软骨细胞胞浆中IKBα 含量明显减少、而胞核中核因子 κB p65的含量明显增多;③结果说明,晚期糖
作者:赵峻;马翅;杨娜娜;唐欣;刘唐浩;谭扬帆;彭秀娟;陈铖
来源:中国组织工程研究 2018 年 22卷 24期