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背景:脂联素基因表达在肾病综合征的发病过程中有着重要的作用,移植脂肪干细胞可以对肾病综合征大鼠起到一定的治疗效果.目的:探讨脂联素基因转染脂肪干细胞移植对肾病综合征大鼠肾功能及凝血功能的改善作用.方法:①在体外复苏培养脂肪干细胞并制备其细胞悬液,采用CM-Dil进行标记,取第3代脂肪干细胞进行脂联素基因电转染,Westem blot检测转染第3天和第28天细胞中脂联素蛋白的相对表达水平;②从80只SD大鼠(北京维通利华动物实验技术有限公司提供)中随机取20只不予任何处理作为正常对照组,其余60只SD大鼠静脉内注射阿霉素建立肾病综合征大鼠模型,随机分为3组:模型组、脂肪干细胞组以及脂联素修饰脂肪干细胞组,正常对照组和模型组大鼠经尾静脉注射20 μL PBS,脂肪干细胞组、脂联素修饰脂肪干细胞组大鼠经尾静脉注射20 μL转染空载质粒的脂肪干细胞悬液或脂联素修饰的脂肪干细胞悬液,1次/d,连续7d;③移植4周后,全自动生化分析仪检测血清生化指标和凝血指标,苏木精-伊红染色观察肾组织病理变化,RT-PCR、Western blot检测肾组织中乙酰肝素酶及脂联素的表达.结果与结论:①Western blot检测显示脂肪干细胞中脂联素高表达可持续28 d;②脂联素修饰脂肪干细胞组的病理改善明显优于脂肪干细胞组,脂肪干细胞组较模型组

作者:田萌;韩鸿玲

来源:中国组织工程研究 2019 年 23卷 5期

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田萌;韩鸿玲
来源:
中国组织工程研究 2019 年 23卷 5期
标签:
肾病综合征 脂联素 基因修饰 脂肪干细胞 细胞移植 肾功能 凝血 乙酰肝素酶
背景:脂联素基因表达在肾病综合征的发病过程中有着重要的作用,移植脂肪干细胞可以对肾病综合征大鼠起到一定的治疗效果.目的:探讨脂联素基因转染脂肪干细胞移植对肾病综合征大鼠肾功能及凝血功能的改善作用.方法:①在体外复苏培养脂肪干细胞并制备其细胞悬液,采用CM-Dil进行标记,取第3代脂肪干细胞进行脂联素基因电转染,Westem blot检测转染第3天和第28天细胞中脂联素蛋白的相对表达水平;②从80只SD大鼠(北京维通利华动物实验技术有限公司提供)中随机取20只不予任何处理作为正常对照组,其余60只SD大鼠静脉内注射阿霉素建立肾病综合征大鼠模型,随机分为3组:模型组、脂肪干细胞组以及脂联素修饰脂肪干细胞组,正常对照组和模型组大鼠经尾静脉注射20 μL PBS,脂肪干细胞组、脂联素修饰脂肪干细胞组大鼠经尾静脉注射20 μL转染空载质粒的脂肪干细胞悬液或脂联素修饰的脂肪干细胞悬液,1次/d,连续7d;③移植4周后,全自动生化分析仪检测血清生化指标和凝血指标,苏木精-伊红染色观察肾组织病理变化,RT-PCR、Western blot检测肾组织中乙酰肝素酶及脂联素的表达.结果与结论:①Western blot检测显示脂肪干细胞中脂联素高表达可持续28 d;②脂联素修饰脂肪干细胞组的病理改善明显优于脂肪干细胞组,脂肪干细胞组较模型组