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背景:骨髓间充质干细胞能分泌多种生长因子并支持造血,但能否保护和修复胰岛细胞功能尚不明确.目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞与其胰岛细胞共培养对胰岛功能的影响.方法:从八九周龄的雄性 SD 大鼠中提取股骨骨髓,采用密度梯度离心法和贴壁培养法相结合提取骨髓间充质干细胞;另取八九周龄的雄性SD大鼠,从胆总管插管注入1 g/L胶原酶P 10 mL,剪下胰腺,采用Histopaque不连续密度梯度离心法分离与纯化胰岛细胞,在显微镜下用1 mL的pipet移液器手工挑取筛选薄膜完整的胰岛细胞.将第3代骨髓间充质干细胞与胰岛细胞进行共培养,共分为4组:对照组(单纯大鼠胰岛细胞培养)、直接共培养组(接种有骨髓间充质干细胞的培养板内加入胰岛细胞进行共培养)、间接共培养组1(利用transwell培养皿进行间接共培养)、间接共培养组 2(利用骨髓间充质干细胞培养液培养胰岛细胞).培养过程中观察胰岛形态及生长状况,在培养后第3,7,14天用ELISA法检测胰岛素分泌量.实验方案经延边大学附属manbet官网登录 医学伦理委员会批准.结果与结论:①4 组之间采用方差分析,骨髓间充质干细胞与胰岛细胞共培养能明显提高胰岛素的分泌量,而且共培养第7天胰岛素分泌量达高峰;②在培养后第7天时,间接共培养组1的胰岛素分泌量明显高于直接共培养组,差异有显著性意义(P

作者:杨慧明;俞星;方宇辉

来源:中国组织工程研究 2019 年 23卷 33期

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杨慧明;俞星;方宇辉
来源:
中国组织工程研究 2019 年 23卷 33期
标签:
骨髓间充质干细胞 胰岛细胞 直接共培养 间接共培养 胰岛素 SD大鼠
背景:骨髓间充质干细胞能分泌多种生长因子并支持造血,但能否保护和修复胰岛细胞功能尚不明确.目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞与其胰岛细胞共培养对胰岛功能的影响.方法:从八九周龄的雄性 SD 大鼠中提取股骨骨髓,采用密度梯度离心法和贴壁培养法相结合提取骨髓间充质干细胞;另取八九周龄的雄性SD大鼠,从胆总管插管注入1 g/L胶原酶P 10 mL,剪下胰腺,采用Histopaque不连续密度梯度离心法分离与纯化胰岛细胞,在显微镜下用1 mL的pipet移液器手工挑取筛选薄膜完整的胰岛细胞.将第3代骨髓间充质干细胞与胰岛细胞进行共培养,共分为4组:对照组(单纯大鼠胰岛细胞培养)、直接共培养组(接种有骨髓间充质干细胞的培养板内加入胰岛细胞进行共培养)、间接共培养组1(利用transwell培养皿进行间接共培养)、间接共培养组 2(利用骨髓间充质干细胞培养液培养胰岛细胞).培养过程中观察胰岛形态及生长状况,在培养后第3,7,14天用ELISA法检测胰岛素分泌量.实验方案经延边大学附属manbet官网登录 医学伦理委员会批准.结果与结论:①4 组之间采用方差分析,骨髓间充质干细胞与胰岛细胞共培养能明显提高胰岛素的分泌量,而且共培养第7天胰岛素分泌量达高峰;②在培养后第7天时,间接共培养组1的胰岛素分泌量明显高于直接共培养组,差异有显著性意义(P