背景:雌激素缺乏可抑制成骨细胞增殖、分化.传统补肾中药淫羊藿作为一种植物雌激素,其有效成分淫羊藿苷能够产生雌激素的部分效应.目的:通过磷酸化蛋白组学技术探究淫羊藿苷非核效应促进成骨细胞增殖、分化过程中可能涉及的信号通路,以及信号通路中磷酸化蛋白级联调控的可能机制.方法:通过新生SD大鼠获取原代成骨细胞并培养、鉴定,CCK-8法检测淫羊藿苷对成骨细胞活性的影响,合成并鉴定淫羊藿苷-牛血清白蛋白偶合物.将原代成骨细胞传至第3代培养24 h后,分为6组:牛血清白蛋白干预组、PBS干预组、淫羊藿苷干预组、淫羊藿苷-牛血清白蛋白偶合物干预组、雌激素受体拮抗剂ICI182780+淫羊藿苷-牛血清白蛋白偶合物干预组、MAPK/ERK1/2通路抑制剂PD98059+淫羊藿苷-牛血清白蛋白偶合物干预组,分别在作用0,5,15,25 min时收集各组细胞,进行蛋白提取、酶解、肽段标记和磷酸化肽段富集,利用液相色谱-质谱联用(LC/MS/MS)技术进行磷酸化蛋白组学分析.结果 与结论:①10μg/L淫羊藿苷可显著促进成骨细胞的增殖、分化;②淫羊藿苷-牛血清白蛋白偶合物能够不透膜而诱导成骨细胞内ERK的磷酸化,证实了非核效应;③磷酸化蛋白组学结果显示:与淫羊藿苷-牛血清白蛋白偶合物干预组相比较,淫羊藿苷干预组、牛血清白蛋白干预组、PBS干预
作者：梅杰；何强；孙欣；尹宏；钱卫庆
来源：中国组织工程研究 2023 年 27卷 20期
