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背景:目前多项研究证实了miRNA影响增生性瘢痕的发生发展,Ⅰ型胶原与增生性瘢痕成纤维细胞密切相关,猜测miR-2116-3p也有可能与增生性瘢痕的发生发展有关系.目的:探讨miR-2116-3p在人增生性瘢痕中的表达及作用.方法:收集新疆医科大学第一附属manbet官网登录 6例患者的增生性瘢痕组织与6例患者重睑术后正常皮肤组织,采用qRT-PCR法检测miR-2116-3p与Ⅰ型胶原的表达.取增生性瘢痕组织,原代培养第3-6代成纤维细胞,分为阴性对照组、miR-2116-3p模拟物组和miR-2116-3p抑制物组,分别转染对应的序列,用CCK-8法与EdU试剂盒检测细胞增殖活力,划痕实验检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡,qRT-PCR法与Western blot法检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α平滑肌肌动蛋白的基因与蛋白表达,双荧光素酶实验验证其靶向结合.结果 与结论:①增生性瘢痕组织中miR-2116-3p的mRNA表达量低于正常皮肤组织(P<0.01),Ⅰ型胶原的mRNA表达量低于正常皮肤组织(P<0.01);②转染后24,48,72 h,与阴性对照组比较,miR-2116-3p模拟物组细胞活力降低(P<0.05或P<0.01),miR-2116-3p抑制物组细胞活力升高(P<0.05或P<0.01);转染后48 h,与阴性对照组比较,miR-2116-3p模拟物组细胞EdU标记数减少(P<0.01),miR-2116-3p抑制物组EdU标记数增加(P<0.05);③转染后24 h,与

作者:田文融;左俊;余扬;齐郁松;艾江;卜盼盼;赵皎均;马志伟;李培培;马少林

来源:中国组织工程研究 2023 年 27卷 28期

知识库介绍

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田文融;左俊;余扬;齐郁松;艾江;卜盼盼;赵皎均;马志伟;李培培;马少林
来源:
中国组织工程研究 2023 年 27卷 28期
标签:
miR-2116-3p Ⅰ型胶原 增生性瘢痕 成纤维细胞 皮肤纤维化
背景:目前多项研究证实了miRNA影响增生性瘢痕的发生发展,Ⅰ型胶原与增生性瘢痕成纤维细胞密切相关,猜测miR-2116-3p也有可能与增生性瘢痕的发生发展有关系.目的:探讨miR-2116-3p在人增生性瘢痕中的表达及作用.方法:收集新疆医科大学第一附属manbet官网登录 6例患者的增生性瘢痕组织与6例患者重睑术后正常皮肤组织,采用qRT-PCR法检测miR-2116-3p与Ⅰ型胶原的表达.取增生性瘢痕组织,原代培养第3-6代成纤维细胞,分为阴性对照组、miR-2116-3p模拟物组和miR-2116-3p抑制物组,分别转染对应的序列,用CCK-8法与EdU试剂盒检测细胞增殖活力,划痕实验检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡,qRT-PCR法与Western blot法检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α平滑肌肌动蛋白的基因与蛋白表达,双荧光素酶实验验证其靶向结合.结果 与结论:①增生性瘢痕组织中miR-2116-3p的mRNA表达量低于正常皮肤组织(P<0.01),Ⅰ型胶原的mRNA表达量低于正常皮肤组织(P<0.01);②转染后24,48,72 h,与阴性对照组比较,miR-2116-3p模拟物组细胞活力降低(P<0.05或P<0.01),miR-2116-3p抑制物组细胞活力升高(P<0.05或P<0.01);转染后48 h,与阴性对照组比较,miR-2116-3p模拟物组细胞EdU标记数减少(P<0.01),miR-2116-3p抑制物组EdU标记数增加(P<0.05);③转染后24 h,与