背景:间充质干细胞的成骨分化过程受多种分子调控,长链非编码RNA因可参与调控多种生物学过程而备受关注,但其对间充质干细胞成骨分化的调控作用尚未得到充分探索.
目的:探讨长链非编码RNA Gm16104对C3H10T1/2间充质干细胞成骨分化的影响.
方法:采用骨形态发生蛋白2诱导C3H10T1/2间充质干细胞成骨分化,成骨诱导5 d进行碱性磷酸酶染色检测细胞成骨分化情况,成骨分化第0,1,3,5天,采用qRT-PCR检测Alpl和Gm16104的表达水平.转染Gm16104过表达质粒然后诱导成骨分化,成骨诱导4 d进行碱性磷酸酶染色和qRT-PCR检测细胞的成骨分化状况,Western blot检测成骨相关信号通路蛋白的表达水平.
结果与结论:①成骨诱导5 d后,碱性磷酸酶活性显著提高;②与第0天比较,成骨诱导第1,3,5天,成骨标志基因Alpl表达升高,而Gm16104的表达水平下调;③pcDNA-Gm16104质粒转染C3H10T1/2细胞后Gm16104表达水平显著增加;④过表达Gm16104可抑制细胞的碱性磷酸酶活性以及成骨标志基因Alpl和成骨相关转录因子Osterix的表达水平;⑤过表达Gm16104显著抑制PI3K和Akt的磷酸化蛋白表达水平;⑥结果表明,过表达Gm16104可能通过PI3K/Akt信号通路抑制C3H10T1/2间充质干细胞成骨分化.
作者：林展莹；林紫云；黄柳艳；张文烯；左长清
来源：中国组织工程研究 2024 年 28卷 31期
