目的 探讨腺相关病毒载体基因转染的有效途径和方法.方法 我们设计肝动脉、门静脉、双重灌注3种途径和传统、循环、夹闭3种转染方法.通过观察肝脏灌注后颜色、检测肝脏功能和肝细胞转染率,确定灌注途径和转染方法,并探讨其安全性.结果 肝脏灌注后颜色无明显差别,无肿胀或花斑出现,血流开放以后肝脏颜色迅速恢复正常,3种灌注途径ALT比较差异无统计学意义(F=0.343,1.265,0.055,P>0.05);1周后肝脏组织均有免疫荧光染色,并且携带增强型绿色荧光蛋白基因的腺相关病毒载体,转染率比较差异无统计学意义(F=0.080,0.091,0.045,P>0.05).传统法的转染率略低于循环法,而夹闭法的转染率在各时间段均高于前两种方法,差异有统计学意义(F=3.880,2.976,5.129,P<0.05).3种方法转染率随时间逐渐升高,6周左右达到高峰,以后缓慢下降.结论 经肝动脉灌注是基因转染的有效途径,夹闭法可以提高目的基因的转染率,两者均无肝脏功能损害,腺相关病毒载体的转染呈缓慢、持续的过程.
作者:邰升;苏志雷;王志兵;方泰石;商文刚;吴德全;韩德恩
来源:中华消化外科杂志 2008 年 7卷 2期