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目的 探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx蛋白)对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体活性的影响及其促进HBV相关性肝细胞肝癌(HCC)的作用机制.方法 采用实验研究方法.将HepG2细胞株分为5组:空白对照组(未转染质粒),空载质粒组[转染pE绿色荧光蛋白(GFP)-N1空载质粒],全长HBx蛋白组(转染pEGFP-N1-X质粒),HBx1-127组(转染pEGFP-N1-X1-127质粒),HBx1-101组(转染pEGFP-N1-X1-101质粒).(1)采用Western blot检测HBx蛋白和NLRP3炎性小体蛋白[采用脂多糖+ ATP干预空白对照组HepG2细胞]的表达.(2)分别采用格列本脲、吡咯烷二硫代甲酸铵盐(APDC)干预全长HBx蛋白HepG2细胞,采用ELISA检测IL-1β和IL-18的表达.(3)采用流式细胞仪检测活性氧的表达.正态分布的计量资料以(x)±s表示,多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用t检验.结果 (1) Western blot检测结果显示:①空白对照组、空载质粒组、全长HBx蛋白组、HBx1-127组、HBx1-101组HepG2细胞中HBx重组质粒融合蛋白的相对表达量分别为0.07±0.03、0.92 ±0.13、0.84±0.11、0.30±0.06、0.29±0.05,其中HBx1-127组和HBx1-101组HepG2细胞中分别为HBx1-127蛋白和HB1-x101蛋白的表达.5组比较,差异有统计学意义(F =61.790,P<0.05).其中全长HBx蛋白组分别与空白对

作者:汪玉兰;陈伟庆

来源:中华消化外科杂志 2016 年 15卷 6期

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汪玉兰;陈伟庆
来源:
中华消化外科杂志 2016 年 15卷 6期
标签:
肝肿瘤 乙型肝炎病毒X蛋白 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体 活性氧 Liver neoplasms Hepatitis B virus X protein NLRP3 inflammasome Reactive oxygen
目的 探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx蛋白)对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体活性的影响及其促进HBV相关性肝细胞肝癌(HCC)的作用机制.方法 采用实验研究方法.将HepG2细胞株分为5组:空白对照组(未转染质粒),空载质粒组[转染pE绿色荧光蛋白(GFP)-N1空载质粒],全长HBx蛋白组(转染pEGFP-N1-X质粒),HBx1-127组(转染pEGFP-N1-X1-127质粒),HBx1-101组(转染pEGFP-N1-X1-101质粒).(1)采用Western blot检测HBx蛋白和NLRP3炎性小体蛋白[采用脂多糖+ ATP干预空白对照组HepG2细胞]的表达.(2)分别采用格列本脲、吡咯烷二硫代甲酸铵盐(APDC)干预全长HBx蛋白HepG2细胞,采用ELISA检测IL-1β和IL-18的表达.(3)采用流式细胞仪检测活性氧的表达.正态分布的计量资料以(x)±s表示,多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用t检验.结果 (1) Western blot检测结果显示:①空白对照组、空载质粒组、全长HBx蛋白组、HBx1-127组、HBx1-101组HepG2细胞中HBx重组质粒融合蛋白的相对表达量分别为0.07±0.03、0.92 ±0.13、0.84±0.11、0.30±0.06、0.29±0.05,其中HBx1-127组和HBx1-101组HepG2细胞中分别为HBx1-127蛋白和HB1-x101蛋白的表达.5组比较,差异有统计学意义(F =61.790,P<0.05).其中全长HBx蛋白组分别与空白对