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目的 构建胶质细胞源性营养因子(GDNF)及内皮素B受体基因(EDNRB)共表达腺病毒并观察其在神经干细胞(NSC)中的表达.方法 利用AdEasy腺病毒表达系统构建GDNF及EDNRB基因共表达腺病毒Ad-GE,体外感染NSC后通过观察绿色荧光蛋白表达及RT-PCR、流式细胞仪法鉴定外源基因的表达.结果 NSC经Ad-GE感染后24 h可观察到绿色荧光蛋白(GFP)表达,RT-PCR、流式细胞仪法证实外源性GDNF及EDNRB基因均可在NSC中表达.结论 成功构建GDNF及EDNRB基因共表达重组腺病毒,证实了其在NSC的表达,为先天性巨结肠的联合基因治疗打下基础.

作者:孙念峰;舒晓刚;张景辉;陈景波;王国斌

来源:中华小儿外科杂志 2006 年 27卷 12期

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作者:
孙念峰;舒晓刚;张景辉;陈景波;王国斌
来源:
中华小儿外科杂志 2006 年 27卷 12期
标签:
干细胞 DNA,重组 腺病毒
目的 构建胶质细胞源性营养因子(GDNF)及内皮素B受体基因(EDNRB)共表达腺病毒并观察其在神经干细胞(NSC)中的表达.方法 利用AdEasy腺病毒表达系统构建GDNF及EDNRB基因共表达腺病毒Ad-GE,体外感染NSC后通过观察绿色荧光蛋白表达及RT-PCR、流式细胞仪法鉴定外源基因的表达.结果 NSC经Ad-GE感染后24 h可观察到绿色荧光蛋白(GFP)表达,RT-PCR、流式细胞仪法证实外源性GDNF及EDNRB基因均可在NSC中表达.结论 成功构建GDNF及EDNRB基因共表达重组腺病毒,证实了其在NSC的表达,为先天性巨结肠的联合基因治疗打下基础.