目的 探讨在成肌分化过程中,组胺H3受体对外源性肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的C2C12细胞炎症反应的作用,从分子角度阐明小儿尿道括约肌的发育和损伤修复过程对外源性炎症刺激的抵抗机制.方法 利用外源性T N F-α刺激小鼠C2C12成肌细胞分化各阶段,将分化0、3、6 d,分别记为D0、D3和D6阶段,在体外模拟小儿尿道括约肌发育和损伤修复过程中遭遇外源性感染的过程.实验分组为空白对照组、TNF-α组、TNF-α+H3受体激动剂(methimepip,Met)组和TNF-α+H3受体阻滞剂(cirpoxifan,CXP)组.采用CCK-8法和流式法检测各组分化过程中细胞的生长活性和凋亡的影响;实时定量聚合酶链反应(quantificational real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测细胞炎症小体蛋白NLRP3以及早中晚细胞分化标志物MyoD1、Myogenin、Myosin-2的表达;ELISA法检测炎性因子IL-1 b的分泌.结果 C2C12细胞分化过程中,CCK-8法检测显示TNF-α和TNF-α+CXP会导致各分化阶段细胞的生长活性明显降低(P<0.05),而TNF-α+Met组的细胞活性与对照组之间的差异无统计学意义(P>0.05).TNF-α和TNF-α+Met均不引起细胞凋亡63.3％,TNF-α+CXP导致61.3％ 的D6阶段细胞发生凋亡.TNF-α诱导D3和D6阶段细胞炎症小体蛋白NLRP-3的mRNA表达分别增加101％ 和90％,M

作者：陈燕；冯锦锦；黄晨旭；李一冬；闫少华；王一鹤；文建国

来源：中华小儿外科杂志 2019 年 40卷 7期