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目的研究单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶/更昔洛韦(herpes simplex virus thymidine kinase-gancyclovir,HSV-tk/GCV)自杀基因系统对视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,Rb)细胞的体外杀伤作用以及旁观者效应发生的机制.方法应用阳离子脂质体将pCMV/hytk-IRES-hrGFP质粒导入人视网膜母细胞瘤株HXO-Rb44细胞,荧光显微镜下观察转染效果,并用潮霉素筛选出转染阳性细胞HXO-Rb44/tk.RT-PCR鉴定hvtk 基因在HXO-Rb44/tk细胞中的整合转录结果.比较转染前后Rb细胞的形态和生长特性.通过MTT法检测GCV对HXORb44/tk细胞的杀伤作用以及对不同比例HXO-Rb44/tk和HXO-Rb444混合细胞的杀伤作用("旁观者效应").并通过上清移换实验研究旁观者效应发生的机制.结果转染效率约为20

作者:李涛;张虹;谢二娟;梁峰;李伟;李贵刚

来源:眼科新进展 2003 年 23卷 5期

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李涛;张虹;谢二娟;梁峰;李伟;李贵刚
来源:
眼科新进展 2003 年 23卷 5期
标签:
视网膜母细胞瘤 基因疗法 自杀基因 胸腺嘧啶核苷激酶 旁观者效应 retinoblastoma gene therapy suicide gene thymidine kinase bystander effect
目的研究单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶/更昔洛韦(herpes simplex virus thymidine kinase-gancyclovir,HSV-tk/GCV)自杀基因系统对视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,Rb)细胞的体外杀伤作用以及旁观者效应发生的机制.方法应用阳离子脂质体将pCMV/hytk-IRES-hrGFP质粒导入人视网膜母细胞瘤株HXO-Rb44细胞,荧光显微镜下观察转染效果,并用潮霉素筛选出转染阳性细胞HXO-Rb44/tk.RT-PCR鉴定hvtk 基因在HXO-Rb44/tk细胞中的整合转录结果.比较转染前后Rb细胞的形态和生长特性.通过MTT法检测GCV对HXORb44/tk细胞的杀伤作用以及对不同比例HXO-Rb44/tk和HXO-Rb444混合细胞的杀伤作用("旁观者效应").并通过上清移换实验研究旁观者效应发生的机制.结果转染效率约为20