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目的将重组表达质粒色素上皮衍生因子-绿色荧光蛋白(pigment epitheliumderived growth factor-green nuoreseent protein,PEDF-GFP)以脂质体介导转染BN大鼠视网膜组织,观察其表达及定位.方法以脂质体介导的方法将重组表达质粒PEDF-GFP注射到BN大鼠视网膜下,于一定时间内分别用荧光显微镜观察GFP表达情况,用RT-PCR方法检测PEDF表达情况.结果在荧光显微镜下观察GFP表达情况,第1 d即可见明显的绿色荧光分布于视网膜全层包括RPE细胞层,第2、3周荧光强度比第1周增强,荧光范围也有所扩大,可以持续表达4周.RT-PCR方法结果类似,转染后第1 d即有PEDF Mrna表达,第1、2周表达明显增强,到第4周治疗眼的视网膜组织中PEDF Mr-NA仍有较高水平的表达.结论阳离子脂质体可有效将PEDF-GFP基因转染视网膜组织、RPE细胞并得到持续表达,可望用于视网膜、脉络膜疾病的基因治疗.

作者:张新秀;何守志;郭维维;翟所强

来源:眼科新进展 2006 年 26卷 4期

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作者:
张新秀;何守志;郭维维;翟所强
来源:
眼科新进展 2006 年 26卷 4期
标签:
基因转染 色素上皮衍生因子 绿色荧光蛋白 视网膜
目的将重组表达质粒色素上皮衍生因子-绿色荧光蛋白(pigment epitheliumderived growth factor-green nuoreseent protein,PEDF-GFP)以脂质体介导转染BN大鼠视网膜组织,观察其表达及定位.方法以脂质体介导的方法将重组表达质粒PEDF-GFP注射到BN大鼠视网膜下,于一定时间内分别用荧光显微镜观察GFP表达情况,用RT-PCR方法检测PEDF表达情况.结果在荧光显微镜下观察GFP表达情况,第1 d即可见明显的绿色荧光分布于视网膜全层包括RPE细胞层,第2、3周荧光强度比第1周增强,荧光范围也有所扩大,可以持续表达4周.RT-PCR方法结果类似,转染后第1 d即有PEDF Mrna表达,第1、2周表达明显增强,到第4周治疗眼的视网膜组织中PEDF Mr-NA仍有较高水平的表达.结论阳离子脂质体可有效将PEDF-GFP基因转染视网膜组织、RPE细胞并得到持续表达,可望用于视网膜、脉络膜疾病的基因治疗.