目的 探讨RNA干扰抑制组织型转谷氨酰胺酶(tissue transglutaminase,tTG)的表达对人转化生长因子β2(transforming growth factor-beta 2,TGF-β2)诱导的晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)转分化和细胞外基质沉积的抑制作用.方法 设计并合成针对tTG的3对小干扰RNA(siRNA):tTG-siRNA-1、tTG-siRNA-2、tTG-siRNA-3,用Real-time PCR和Western blot检测转染了siRNA后HLE-B3细胞表达tTG mRNA 和tTG蛋白的变化.然后将体外培养的HLE-B3细胞分为正常对照组、TGF-β2组和TGF-β2+ siRNA组.48 h后,用Western blot检测各组tTG、平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)和Ⅳ型胶原(collagen Ⅳ,Col-Ⅳ)的表达.结果 转染tTG-siRNA-1、tTG-siRNA-2、tTG-siRNA-3 48 h后,tTG mRNA的表达分别下降为空白对照组的46.60%、12.84%、66.75%(均为P<0.05);tTG蛋白的表达量分别下降为空白对照组的60.49%、27.87%、55.91%(均为P<o.o1).Real-time PCR与Western blot检测结果一致显示了tTG-siRNA-2对tTG基因的抑制效果最佳.与正常对照组相比,TGF-β2组中tTG、α-SMA、FN、Col-Ⅳ的表达量均明显增加(均为P<0.01);与TGF-β2组相比,TGF-β2+ tTG-siRNA-2组中tTG、α-SMA、F
作者:邢星;胡义珍;李世洋;马红利
来源:眼科新进展 2012 年 32卷 1期