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目的 探讨色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)对高糖刺激下视网膜Müller细胞凋亡的影响,为PEDF治疗糖尿病视网膜病变提供实验依据.方法 实验分3组,分别是正常对照组、高糖模型(HG)组(培养基内含有25mmol·L-1的葡萄糖)和PEDF处理高糖模型(HG+PEDF)组(在高糖培养基础上加入25 mg·L-1的PEDF).反复胰蛋白酶消化法培养纯化SD大鼠视网膜Müller细胞,免疫荧光双标鉴定纯度;应用倒置相差显微镜观察Müller细胞形态,AnnexinⅤ-FITC、PI染色流式细胞技术检测Müller细胞的凋亡率,RT-PCR测定Müller细胞bcl-2、bax mRNA的表达变化.结果 原代培养的Müller细胞传至3代时纯度为95%以上.正常对照组、HG组、HG+ PEDF组Müller细胞早期凋亡率分别为(1.223±0.106)%、(2.657±0.120)%、(1.907±0.117)%,bax mRNA相对灰度值分别为0.269±0.041、0.804±0.052、0.528±0.018,bcl-2 mRNA相对灰度值分别为0.904±0.021、0.413±0.015、0.521±0.010.HG组与正常对照组相比,Müller细胞形态发生明显改变,细胞凋亡率显著增加(P <0.001),bax mRNA表达显著升高,bcl-2 mRNA表达显著降低(均为P<0.01);HG+ PEDF组Müller细胞凋亡率较HG组显著降低(P<0.001),bax mRNA表达显著降低,bcl-2 mRNA表达显著

作者:李梦云;李艳;刘宏波;毕欢丽;张杰

来源:眼科新进展 2014 年 34卷 6期

知识库介绍

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作者:
李梦云;李艳;刘宏波;毕欢丽;张杰
来源:
眼科新进展 2014 年 34卷 6期
标签:
色素上皮衍生因子 高糖刺激 Müller细胞 bcl-2基因 bax基因 细胞凋亡 PEDF high glucose stimulation Müller cell bcl-2 bax cell apoptosis
目的 探讨色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)对高糖刺激下视网膜Müller细胞凋亡的影响,为PEDF治疗糖尿病视网膜病变提供实验依据.方法 实验分3组,分别是正常对照组、高糖模型(HG)组(培养基内含有25mmol·L-1的葡萄糖)和PEDF处理高糖模型(HG+PEDF)组(在高糖培养基础上加入25 mg·L-1的PEDF).反复胰蛋白酶消化法培养纯化SD大鼠视网膜Müller细胞,免疫荧光双标鉴定纯度;应用倒置相差显微镜观察Müller细胞形态,AnnexinⅤ-FITC、PI染色流式细胞技术检测Müller细胞的凋亡率,RT-PCR测定Müller细胞bcl-2、bax mRNA的表达变化.结果 原代培养的Müller细胞传至3代时纯度为95%以上.正常对照组、HG组、HG+ PEDF组Müller细胞早期凋亡率分别为(1.223±0.106)%、(2.657±0.120)%、(1.907±0.117)%,bax mRNA相对灰度值分别为0.269±0.041、0.804±0.052、0.528±0.018,bcl-2 mRNA相对灰度值分别为0.904±0.021、0.413±0.015、0.521±0.010.HG组与正常对照组相比,Müller细胞形态发生明显改变,细胞凋亡率显著增加(P <0.001),bax mRNA表达显著升高,bcl-2 mRNA表达显著降低(均为P<0.01);HG+ PEDF组Müller细胞凋亡率较HG组显著降低(P<0.001),bax mRNA表达显著降低,bcl-2 mRNA表达显著