目的 研究秋水仙碱对体外培养的人眼Tenon囊成纤维细胞(human Tenon's capsule fibroblasts,HTCFs)增殖及凋亡的影响.方法 体外培养HTCFs,并对传代培养的细胞进行鉴定;采用MTS法检测不同浓度的秋水仙碱对HTCFs增殖的抑制作用;以Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测秋水仙碱对细胞凋亡的影响;使用蛋白质印迹法检测秋水仙碱对凋亡相关蛋白聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)、Caspase-9、Caspase-3及active-Caspase-3表达的影响.结果 MTS检测显示秋水仙碱对HTCFs具有明显抑制作用,并呈剂量及时间依赖性.流式细胞术检测发现秋水仙碱作用48 h可诱导HTCFs发生剂量依赖性凋亡,与对照组相比,5μmol·L-1、10 μmol·L-1、20μmol·L-1的秋水仙碱作用HTCFs的凋亡率分别为(18.37±4.26)%、(33.80±5.02)%及(52.00±2.00)%,差异具有统计学意义(F=91.59,P<0.00l).蛋白质印迹法检测结果显示,秋水仙碱可诱导细胞内凋亡关键蛋白Caspase-3及PARP的活化.结论 秋水仙碱可以明显抑制HTCFs的体外增殖,其机制可能与线粒体凋亡途径的激活而诱导细胞发生凋亡相关.
作者:孔蕾;胡敏;华启云;张荭
来源:眼科新进展 2017 年 37卷 4期