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目的 探讨梯度浓度全反式视黄酸(all-trans retinoic acid,ATRA)诱导人视网膜色素上皮细胞凋亡的作用.方法 采用流式细胞术检测视网膜色素上皮细胞凋亡、活性氧(ROS)活性.采用实时定量聚合酶链反应和Western blot,从蛋白水平检测梯度浓度ATRA对ARPE-19细胞内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)标记蛋白表达的影响.观察抗氧化剂NAC及ERS抑制剂Salubrinal抑制ARPE-19细胞诱导ROS和ERS的作用.结果 CCK-8检测结果显示:ATRA处理ARPE-19细胞24 h和48 h后的半抑制浓度(IC50)分别为13.88μmol·L-1和11.99μmol·L-1.流式细胞术检测结果显示,10.0μmol·L-1、15.0μmol·L-1、20.0μmol·L-1 ATRA处理后细胞凋亡水平均较对照组显著上升,差异均有统计学意义(均为P<0.001);2.5μmol·L-1、5.0μmol·L-1、10.0μmol·L-1、20.0μmol·L-1 ATRA处理后细胞的ROS水平均较对照组显著增加,差异均有统计学意义(均为P<0.001).Western blot检测结果显示,ERS标记蛋白C/EBP同源蛋白(C/EBPhomologous protein,CHOP)、结合免疫球蛋白(binding immunoglobulin protein,BIP)的蛋白表达水平与对照组差异均有统计学意义(均为P<0.05);经ATRA处理的模型组较对照组的血管内皮生长因子A(VEGF-A)、CHOP蛋白表达水平均显著上升,N

作者:吴娟;崔冬梅;曾骏文

来源:眼科新进展 2020 年 40卷 12期

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作者:
吴娟;崔冬梅;曾骏文
来源:
眼科新进展 2020 年 40卷 12期
标签:
全反式视黄酸 视网膜色素上皮 凋亡 活性氧 内质网应激
目的 探讨梯度浓度全反式视黄酸(all-trans retinoic acid,ATRA)诱导人视网膜色素上皮细胞凋亡的作用.方法 采用流式细胞术检测视网膜色素上皮细胞凋亡、活性氧(ROS)活性.采用实时定量聚合酶链反应和Western blot,从蛋白水平检测梯度浓度ATRA对ARPE-19细胞内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)标记蛋白表达的影响.观察抗氧化剂NAC及ERS抑制剂Salubrinal抑制ARPE-19细胞诱导ROS和ERS的作用.结果 CCK-8检测结果显示:ATRA处理ARPE-19细胞24 h和48 h后的半抑制浓度(IC50)分别为13.88μmol·L-1和11.99μmol·L-1.流式细胞术检测结果显示,10.0μmol·L-1、15.0μmol·L-1、20.0μmol·L-1 ATRA处理后细胞凋亡水平均较对照组显著上升,差异均有统计学意义(均为P<0.001);2.5μmol·L-1、5.0μmol·L-1、10.0μmol·L-1、20.0μmol·L-1 ATRA处理后细胞的ROS水平均较对照组显著增加,差异均有统计学意义(均为P<0.001).Western blot检测结果显示,ERS标记蛋白C/EBP同源蛋白(C/EBPhomologous protein,CHOP)、结合免疫球蛋白(binding immunoglobulin protein,BIP)的蛋白表达水平与对照组差异均有统计学意义(均为P<0.05);经ATRA处理的模型组较对照组的血管内皮生长因子A(VEGF-A)、CHOP蛋白表达水平均显著上升,N