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目的 探讨长链非编码RNA (lncRNA)-心肌梗死相关转录本(myocardial infarction-associated transcript,MIAT)对过氧化氢(H2O2)诱导的人晶状体上皮细胞凋亡和氧化应激的调控作用.方法 体外培养人晶状体上皮细胞株HLE-B3,分为空白对照组、H2O2组、阴性对照组(转染空质粒)、si-MIAT组(慢病毒感染siMIAT质粒)、si-MIAT+ miR-22 inhibitor组(慢病毒感染siMIAT质粒+脂质体转染miR-22 inhibitor),除空白对照组外,各组细胞均用100μmol·L-H2O2培养12 h.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定各组细胞中lncRNA-MIAT的相对表达水平.采用CCK-8法检测细胞存活率和凋亡率.流式细胞仪检测细胞内活性氧簇(ROS)水平.双荧光素酶和RNA结合蛋白免疫共沉淀实验分析lncRNA-MIAT和miR-22以及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)的靶向关系.Western blot检测各组细胞中p38MAPK、p-p38 MAPK、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p-JNK蛋白表达.结果 与空白对照组相比,H2O2组可诱导HLE-B3细胞lncRNA-MIAT表达上调,miR-22表达降低(均为P<0.05).与空白对照组和阴性对照组相比,si-MIAT组细胞miR-22相对表达量升高,而与si-MIAT组相比,si-MIAT+ miR-22 inhibitor组细胞miR-22相对表达量降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05).与H2O2组相比,si-MIAT+H2O2组细

作者:卞龙艳;庄敏;李姝;戴颖

来源:眼科新进展 2021 年 41卷 4期

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卞龙艳;庄敏;李姝;戴颖
来源:
眼科新进展 2021 年 41卷 4期
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长链非编码RNA-心肌梗死相关转录本 miR-22 凋亡 p38丝裂原活化蛋白激酶 人晶状体上皮细胞
目的 探讨长链非编码RNA (lncRNA)-心肌梗死相关转录本(myocardial infarction-associated transcript,MIAT)对过氧化氢(H2O2)诱导的人晶状体上皮细胞凋亡和氧化应激的调控作用.方法 体外培养人晶状体上皮细胞株HLE-B3,分为空白对照组、H2O2组、阴性对照组(转染空质粒)、si-MIAT组(慢病毒感染siMIAT质粒)、si-MIAT+ miR-22 inhibitor组(慢病毒感染siMIAT质粒+脂质体转染miR-22 inhibitor),除空白对照组外,各组细胞均用100μmol·L-H2O2培养12 h.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定各组细胞中lncRNA-MIAT的相对表达水平.采用CCK-8法检测细胞存活率和凋亡率.流式细胞仪检测细胞内活性氧簇(ROS)水平.双荧光素酶和RNA结合蛋白免疫共沉淀实验分析lncRNA-MIAT和miR-22以及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)的靶向关系.Western blot检测各组细胞中p38MAPK、p-p38 MAPK、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p-JNK蛋白表达.结果 与空白对照组相比,H2O2组可诱导HLE-B3细胞lncRNA-MIAT表达上调,miR-22表达降低(均为P<0.05).与空白对照组和阴性对照组相比,si-MIAT组细胞miR-22相对表达量升高,而与si-MIAT组相比,si-MIAT+ miR-22 inhibitor组细胞miR-22相对表达量降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05).与H2O2组相比,si-MIAT+H2O2组细