目的 探讨纳豆激酶(NK)对高糖缺氧导致的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)损伤的保护作用.方法 不同浓度的葡萄糖和氯化钴(CoCl2)诱导培养ARPE-19细胞24 h后,观察细胞形态变化,采用CCK-8法检测ARPE-19细胞活性.Western blot和RT-qPCR检测紧密连接蛋白-1(ZO-1)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18的表达情况,筛选最佳葡萄糖和CoCl2浓度构建体外高糖缺氧的细胞模型.CCK-8法筛选合适的NK浓度,将ARPE-19细胞分为正常糖组(5.5 mmol·L-1葡萄糖,NC组)、高糖+CoCl2组(25.0 mmol·L-1葡萄糖+200μmol·L-1 CoCl2,HG+CoCl2组)和NK处理组(1.0μmol·L-1 NK+25.0 mmol·L-1葡萄糖+200μmol·L-1 CoCl2,NK+HG+CoCl2组),采用Western blot和RT-qPCR检测各组ARPE-19细胞中ZO-1、HIF-1α及VEGFA的蛋白和mRNA表达水平.结果 CCK-8法检测结果显示,与NC组比较,CoCl2浓度高于200μmol·L-1的干预组中ARPE-19细胞的活性均明显降低(均为P<0.01),且细胞形态发生明显改变.Western blot和RT-qPCR检测结果显示,与NC组比较,200μmol·L-1 CoCl2的干预组ARPE-19细胞中HIF-1α和VEGFA的蛋白和mRNA与IL-1β和IL-18的mRNA的表达水平均明显增加(均为P<0.01),而ZO-1蛋白的表达水平均明显降低(

作者：杨倩；薛瑢；董怡辰；范夏莲；余川；万光明

来源：眼科新进展 2022 年 42卷 10期