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背增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是导致视网膜脱离手术失败的最主要原因之一.蛋白质组学是研究人体组织中差异蛋白的重要方法.目的应用双向凝胶电泳(2-DE)联合质谱分析法对原发性视网膜脱离伴PVR患者进行差异蛋白质组分析,筛选出PVR眼特异的蛋白质表达.方法经玻璃体切割术收集PVR B级(轻度PVR),PVR C、D级(重度PVR)患者各8例8眼的玻璃体标本进行(2-DE)联合质谱检测分析,正常供体8眼作为对照.抽取的玻璃体标本再水化液重溶后,加至固相pH梯度胶条(18 cm,pH3-10)水化,等电聚焦,平衡后进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,银染.对差异明显的蛋白质点(至少2倍以上的吸光度)进行胶内酶解,质谱鉴定.结果供体眼、轻度PVR眼和严重PVR眼经2-DE图谱分别检测到玻璃体标本中47、184和336个蛋白质点,PVR增加的蛋白质点的pH等电点以5-8居多,轻度PVR和重度PVR分别为104(56.5

作者:于靖;王方

来源:中华实验眼科杂志 2011 年 29卷 4期

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作者:
于靖;王方
来源:
中华实验眼科杂志 2011 年 29卷 4期
标签:
蛋白质组 增生性玻璃体视网膜病变 玻璃体 Proteome Proliferative vitreoretinopathy Vitreous
背增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是导致视网膜脱离手术失败的最主要原因之一.蛋白质组学是研究人体组织中差异蛋白的重要方法.目的应用双向凝胶电泳(2-DE)联合质谱分析法对原发性视网膜脱离伴PVR患者进行差异蛋白质组分析,筛选出PVR眼特异的蛋白质表达.方法经玻璃体切割术收集PVR B级(轻度PVR),PVR C、D级(重度PVR)患者各8例8眼的玻璃体标本进行(2-DE)联合质谱检测分析,正常供体8眼作为对照.抽取的玻璃体标本再水化液重溶后,加至固相pH梯度胶条(18 cm,pH3-10)水化,等电聚焦,平衡后进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,银染.对差异明显的蛋白质点(至少2倍以上的吸光度)进行胶内酶解,质谱鉴定.结果供体眼、轻度PVR眼和严重PVR眼经2-DE图谱分别检测到玻璃体标本中47、184和336个蛋白质点,PVR增加的蛋白质点的pH等电点以5-8居多,轻度PVR和重度PVR分别为104(56.5