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背景 房水外流通路的阻塞或小梁网细胞外基质( ECM)的异常堆积导致房水流畅系数降低是引起眼压升高的原因之一,基质金属蛋白酶(MMPs)和组织金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)的平衡对ECM的代谢至关重要,白细胞介素-1α(IL-1α)可以通过调节MMPs的表达而调节房水的外流。 目的 研究猪重组IL-1α对体外培养的猪眼小梁细胞MMP-2、MMP-3及TIMP-1表达的影响。 方法从猪眼取出带有小梁组织的巩膜,用组织块培养法培养小梁细胞并进行传代,第3代的猪小梁细胞应用纤维连接蛋白(FN)和层黏连蛋白(LM)进行鉴定。第3代小梁细胞血清饥饿培养24 h后分为2组,对照组加入无血清培养基,IL组加入10m/LIL-1α,分别培养30 min。采用细胞免疫化学法分析IL组MMP-2、MMP-3及TIMP-1蛋白在培养小梁细胞中的表达;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测小梁细胞中MMP-2 mRNA、MMP-3 mRNA及TIMP-1 mRNA的表达,并与对照组的检测结果进行比较。 结果传3代的细胞对FN和LM呈现阳性反应。与对照组比较,IL组小梁细胞中MMP-3和TIMP-1蛋白的表达量(A值)明显升高,差异均有统计学意义(t=-7.694、t=-5.199,P<0.05),但2组间小梁细胞中MMP-2表达的差异无统计学意义(t=-2.365,P>0.05)。IL组小梁细胞中MMP-3 mRNA和TIMP-1 mRNA的表达量(A值)明显高

作者:王杰;朱玉广;王夕娟;朱艳;张立华;钟莹莹;杜孝楠

来源:中华实验眼科杂志 2011 年 29卷 9期

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作者:
王杰;朱玉广;王夕娟;朱艳;张立华;钟莹莹;杜孝楠
来源:
中华实验眼科杂志 2011 年 29卷 9期
标签:
白细胞介素-1α 小梁细胞 基质金属蛋白酶 组织金属蛋白酶抑制剂 细胞外基质 Interleukin-1 α Trabecular meshwork cell Matrix metalloproteinases Tissue inhibitors of matrix metalloproteinases Extracellular matrix
背景 房水外流通路的阻塞或小梁网细胞外基质( ECM)的异常堆积导致房水流畅系数降低是引起眼压升高的原因之一,基质金属蛋白酶(MMPs)和组织金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)的平衡对ECM的代谢至关重要,白细胞介素-1α(IL-1α)可以通过调节MMPs的表达而调节房水的外流。 目的 研究猪重组IL-1α对体外培养的猪眼小梁细胞MMP-2、MMP-3及TIMP-1表达的影响。 方法从猪眼取出带有小梁组织的巩膜,用组织块培养法培养小梁细胞并进行传代,第3代的猪小梁细胞应用纤维连接蛋白(FN)和层黏连蛋白(LM)进行鉴定。第3代小梁细胞血清饥饿培养24 h后分为2组,对照组加入无血清培养基,IL组加入10m/LIL-1α,分别培养30 min。采用细胞免疫化学法分析IL组MMP-2、MMP-3及TIMP-1蛋白在培养小梁细胞中的表达;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测小梁细胞中MMP-2 mRNA、MMP-3 mRNA及TIMP-1 mRNA的表达,并与对照组的检测结果进行比较。 结果传3代的细胞对FN和LM呈现阳性反应。与对照组比较,IL组小梁细胞中MMP-3和TIMP-1蛋白的表达量(A值)明显升高,差异均有统计学意义(t=-7.694、t=-5.199,P<0.05),但2组间小梁细胞中MMP-2表达的差异无统计学意义(t=-2.365,P>0.05)。IL组小梁细胞中MMP-3 mRNA和TIMP-1 mRNA的表达量(A值)明显高