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背景 性激素在干眼症的发病过程中起着重要的作用,尤其是对泪腺的功能起到非常重要的调控作用,但其对泪腺上皮细胞凋亡作用的机制尚不完全明确.目的 探讨雌二醇及丙酸睾酮对H2O2诱导的兔泪腺上皮细胞的凋亡作用.方法 分离2~3月龄雄性普通级新西兰兔的泪腺组织,用组织块培养法体外培养兔泪腺上皮细胞,用细胞角蛋白(CK)抗体对培养的细胞进行免疫细胞化学鉴定.取对数生长期的细胞,以5×104个/ml接种于96孔板培养44 h后,培养基中分别加入1×10-5、1×10-6、1×10-7、1×10-8 mol/L的雌二醇或丙酸睾酮培养24 h,再加入1×10-4 mol/L H2O2培养1h诱导细胞凋亡,仅用H2O2作用的细胞作为凋亡对照组,常规培养的细胞作为空白对照组.MTT比色法检测各组细胞570 nm处泪腺上皮细胞活性的吸光度(A570)值,流式细胞仪Annexin V/PI双染法检测各组细胞的凋亡情况.结果 培养的细胞呈不规则多边形,其中80%以上的细胞对CK呈阳性反应.MTT比色法检测表明,与空白对照组比较,凋亡对照组、不同浓度雌二醇组和丙酸睾酮组的A570值均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01),1×10-5、1×10-6、1×10-7mol/L雌二醇组和1×10-6 mol/L丙酸睾酮组的A570值均明显高于凋亡对照组,差异均有统计学意义(P<0.01).与相应浓度丙酸睾酮组相比,雌二醇组

作者:沙翔垠;罗春云;宋莉;樊飞红;贺小松;杜道兵

来源:中华实验眼科杂志 2011 年 29卷 12期

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作者:
沙翔垠;罗春云;宋莉;樊飞红;贺小松;杜道兵
来源:
中华实验眼科杂志 2011 年 29卷 12期
标签:
干眼症 泪腺上皮细胞 凋亡 雌二醇 丙酸睾酮 过氧化氢 Dry eye Lacrimal gland cell Apoptosis Estradiol Testosterone H2O2
背景 性激素在干眼症的发病过程中起着重要的作用,尤其是对泪腺的功能起到非常重要的调控作用,但其对泪腺上皮细胞凋亡作用的机制尚不完全明确.目的 探讨雌二醇及丙酸睾酮对H2O2诱导的兔泪腺上皮细胞的凋亡作用.方法 分离2~3月龄雄性普通级新西兰兔的泪腺组织,用组织块培养法体外培养兔泪腺上皮细胞,用细胞角蛋白(CK)抗体对培养的细胞进行免疫细胞化学鉴定.取对数生长期的细胞,以5×104个/ml接种于96孔板培养44 h后,培养基中分别加入1×10-5、1×10-6、1×10-7、1×10-8 mol/L的雌二醇或丙酸睾酮培养24 h,再加入1×10-4 mol/L H2O2培养1h诱导细胞凋亡,仅用H2O2作用的细胞作为凋亡对照组,常规培养的细胞作为空白对照组.MTT比色法检测各组细胞570 nm处泪腺上皮细胞活性的吸光度(A570)值,流式细胞仪Annexin V/PI双染法检测各组细胞的凋亡情况.结果 培养的细胞呈不规则多边形,其中80%以上的细胞对CK呈阳性反应.MTT比色法检测表明,与空白对照组比较,凋亡对照组、不同浓度雌二醇组和丙酸睾酮组的A570值均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01),1×10-5、1×10-6、1×10-7mol/L雌二醇组和1×10-6 mol/L丙酸睾酮组的A570值均明显高于凋亡对照组,差异均有统计学意义(P<0.01).与相应浓度丙酸睾酮组相比,雌二醇组