背景 转化生长因子-β2(TGF-β2)诱导的人晶状体上皮细胞(LECs)上皮细胞-肌成纤维细胞转化(EMT)过程是后发性白内障(PCO)的主要发病机制,因此寻求有效抑制这一作用的药物对于防治PCO有重要意义. 目的 观察雷帕霉素(RAPA)对人LECs增生和TGF-β2诱导的EMT的抑制作用. 方法 采用含质量分数10％胎牛血清的DMEM高糖细胞培养液对人LECs系SRA01/04进行体外培养,换以无血清培养液培养后分别用TGF-β2(5 mg/L)、TGF-β2+ 10 mg/L RAPA、TGF-β2+ 100 mg/L RAPA、TGF-β2+ 1000 mg/LRAPA、TGF-β2+10 000 mg/L RAPA共培养SRA01/04 72 h,仅用无血清培养液培养的SRA01/04作为对照组.采用MTT法检测各组SRA01/04的吸光度(A490)值以评估SRA01/04的增生情况,并计算RAPA对细胞生长的抑制率.各组细胞作用48 h后,采用逆转录PCR(RT-PCR)法和Western blot法分别检测LECs ETM的标志物-α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和上皮性钙黏附蛋白(E-cad)的表达.选取TGF-β2 +400 mg/L RAPA分别作用于培养的SRA01/04 24、48、72 h,采用Western blot法检测SRA01/04中α-SMA、E-cad的表达水平. 结果 MTT法检测结果显示,对照组、TGF-β2组、TGF-β2+10 mg/L RAPA组、TGF-β2+ 100 mg/L RAPA组、TGF-β2+1000 mg/L RAPA组和TGF-β2+10 000 mg/L RAPA

作者：林婷婷；王思敏；刘加勇；冯浩；宁宏

来源：中华实验眼科杂志 2013 年 31卷 4期