背景 玻璃体视网膜手术后视网膜色素上皮(RPE)细胞的增生和移行是增生性玻璃体视网膜病变(PVR)发生的主要病理机制,干预RPE细胞的生物学行为对于PVR的靶向治疗有重要意义. 目的 观察整合素连接激酶(ILK)对RPE细胞生长、凋亡及分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响. 方法 用低糖DMEM培养基常规培养和传代人RPE D407细胞系,选择50代以内的细胞进行实验.应用特异性敲减ILK的小干扰RNA(siRNA) (ILK-siRNA)与100μl无血清培养基和RPE细胞共培养的方式转染RPE细胞作为实验组,应用非特异性siRNA转染RPE细胞作为对照组,分别将24孔板置于37℃、体积分数5％ CO2孵箱中孵育.转染48 h后,应用MTT比色法检测各组RPE细胞活力；应用流式细胞仪检测RPE细胞的生长周期及细胞凋亡情况；采用Western blot法检测并比较各组RPE细胞中cyclin D1和caspase-3表达水平的变化；应用ELISA法检测并比较各组RPE细胞分泌VEGF水平的变化. 结果 转染siRNA 48 h后,MTT法检测见实验组和对照组RPE细胞活力分别为(43.69±0.89)％和(73.95±1.20)％,实验组比对照组降低了40.92％,差异有统计学意义(t=49.524,P=0.000).流式细胞术检测发现,实验组处于G1期的细胞数为(83.30±1.26)％,对照组为(47.10±0.93)％；实验组S期细胞数量显著减少,为(12.63±0.

作者：郭丽莉；于文贞；黎晓新；周玮琰；谢万坤；赵敏；陈欢；何培英

来源：中华实验眼科杂志 2013 年 31卷 8期