背景 研究表明,羟基喜树碱(HCPT)和依托泊苷(VP-16)均能诱导人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)的凋亡,但这两种药物联合应用对体外培养的HTFs是否有协同作用尚不明确. 目的 观察HCPT与VP-16联合应用后在促进体外培养的HTFs凋亡方面是否有协同性,并探讨其作用机制. 方法 人眼Tenon囊成纤维组织取自江苏省人民manbet官网登录 眼库,采用组织块培养法培养和传代HTFs,采用免疫组织化学法检测HTFs中波形蛋白的表达.第4代HTFs接种于96孔板,分别将不同质量浓度的HCPT(1、5、10、50、100 mg/L)、VP-16 (0.6、2.5、5.0、25.0、50.0 mg/L)、HCPT+VP-16(质量比为2:1,终质量浓度分别为0.80、3.75、7.50、37.50、75.00 mg/L)加入细胞培养孔处理24 h,用CCK-8法检测各组药物对细胞增生的抑制率.将HTFs分为空白对照组、HCPT(50 mg/L)处理组、VP-16(25 mg/L)处理组、HCPT+VP-16(37.5 mg/L)处理组,药物处理24 h后用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率.提取细胞内总蛋白,采用Western blot法检测各药物处理组细胞内caspase-3、活化型caspase-3、bax、bel-2、JNK、p-JNK、Akt、p-Akt的表达水平. 结果 培养的细胞呈多边形或不规则形,波形蛋白表达阳性.不同质量浓度HCPT、VP-16和HCPT+VP-16作用24 h后,随着药物质量浓度的增加,对HTFs增生的抑制率增加,

作者：于东毅；傅煜轩；姚志峰；袁志兰

来源：中华实验眼科杂志 2014 年 32卷 2期