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背景 脉络膜新生血管(CNV)是多种眼底疾病造成视力损害的的主要原因之一.近年来的研究发现单核细胞来源的巨噬细胞(F4/80)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在CNV的形成过程中发挥作用,但它们在新生血管发生早期的动态表达及机制仍不明确. 目的 观察CNV模型小鼠在CNV发展早期局部组织中巨噬细胞和MCP-1表达的动态变化.方法 SPF级8周龄雄性野生C57BL/6小鼠105只,用氪离子激光仪对小鼠的任意一侧眼在距视盘2~3倍视盘直径处的3:00、6:00、9:00和12:00方位进行激光光凝以建立CNV动物模型.按照随机数字表法将CNV小鼠模型随机分不同时间点组,分别于光凝后6、12、24、48和72 h各处死小鼠,摘取眼球组织后制备眼球壁组织切片、脉络膜铺片和视网膜色素上皮(RPE)-脉络膜复合体切片,采用苏木精-伊红染色,观察视网膜光凝后眼球壁各层的组织病理学改变和炎症反应情况;采用免疫荧光双标记技术测定小鼠视网膜-脉络膜组织中F4/80和MCP-I的表达和分布;采用免疫荧光技术检测小鼠脉络膜铺片中F4/80的表达和分布;采用实时荧光定量PCR技术检测小鼠RPE-脉络膜组织中F4/80 mRNA的相对表达量;采用ELISA法定量检测小鼠RPE-脉络膜组织中MCP-1质量分数.以光凝后6h组小鼠非实验眼作为正常对照. 结果 视网膜光凝后6h光学显微镜下可见光凝区B

作者:张淑锟;谢平;袁冬青;刘庆淮

来源:中华实验眼科杂志 2015 年 33卷 12期

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作者:
张淑锟;谢平;袁冬青;刘庆淮
来源:
中华实验眼科杂志 2015 年 33卷 12期
标签:
脉络膜新生血管化 炎症 单核细胞源性巨噬细胞 单核细胞趋化蛋白-1 近交系C57BL小鼠 Choroidal neovascularization Inflammation Monocyte-derived macrophages Monocyte chemoattractant protein-1 Mice,inbred C57BL
背景 脉络膜新生血管(CNV)是多种眼底疾病造成视力损害的的主要原因之一.近年来的研究发现单核细胞来源的巨噬细胞(F4/80)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在CNV的形成过程中发挥作用,但它们在新生血管发生早期的动态表达及机制仍不明确. 目的 观察CNV模型小鼠在CNV发展早期局部组织中巨噬细胞和MCP-1表达的动态变化.方法 SPF级8周龄雄性野生C57BL/6小鼠105只,用氪离子激光仪对小鼠的任意一侧眼在距视盘2~3倍视盘直径处的3:00、6:00、9:00和12:00方位进行激光光凝以建立CNV动物模型.按照随机数字表法将CNV小鼠模型随机分不同时间点组,分别于光凝后6、12、24、48和72 h各处死小鼠,摘取眼球组织后制备眼球壁组织切片、脉络膜铺片和视网膜色素上皮(RPE)-脉络膜复合体切片,采用苏木精-伊红染色,观察视网膜光凝后眼球壁各层的组织病理学改变和炎症反应情况;采用免疫荧光双标记技术测定小鼠视网膜-脉络膜组织中F4/80和MCP-I的表达和分布;采用免疫荧光技术检测小鼠脉络膜铺片中F4/80的表达和分布;采用实时荧光定量PCR技术检测小鼠RPE-脉络膜组织中F4/80 mRNA的相对表达量;采用ELISA法定量检测小鼠RPE-脉络膜组织中MCP-1质量分数.以光凝后6h组小鼠非实验眼作为正常对照. 结果 视网膜光凝后6h光学显微镜下可见光凝区B