背景 富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61)/CCN1在早产儿视网膜病变(ROP)的视网膜新生血管(RNV)形成中发挥重要作用,但目前国内外关于CCN1小于扰RNA(CCN1 siRNA)对ROP有无延缓和治疗作用的研究较少.目的 探讨特异性抑制CCN1的表达对视网膜血管内皮细胞的调控作用.方法 恒河猴脉络膜-视网膜内皮细胞株(RF/6A)分别于常氧(正常对照组)和低氧环境(体积分数1％O2、5％ CO2和94％N2的混合气体)中培养,低氧环境培养的细胞分别采用脂质体LipofectamineTM 2000介导转染空载体质粒(低氧对照组)和CCN1 siRNA表达质粒(CCN1 siRNA转染组),于细胞转染后24 h采用逆转录PCR法检测细胞中CCN1siRNA重组质粒的表达情况;分别于培养后0、24、48、72和96 h采用细胞计数试剂盒培(CCK-8)法测定各组细胞活性并绘制细胞生长曲线;于培养后24 h采用流式细胞术检测各组培养细胞的增生和凋亡情况;于培养后24 h采用免疫荧光技术和Western blot法检测各组RF/6A细胞中CCN1和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达.结果 细胞转染后24 h用逆转录法检测到细胞中CCN1 siRNA的表达条带.CCK-8检测显示随着培养时间的延长,RF/6A细胞增生值(吸光度,A值)均明显增加,但CCN1 siRNA转染组各时间点细胞增生值均明显低于正常对照组和低氧对照组,总体比较差异均有统计学
作者：底煜；张轶欧；王爱媛；陈晓隆
来源：中华实验眼科杂志 2016 年 34卷 1期
