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背景 研究已证实莱菔硫烷(SFN)为一种有效的化学预防剂,能调控生物体不同的分子机制以抑制细胞的无序生长.自噬是人体细胞维持自身内环境的生物过程,探讨SFN对晶状体上皮细胞(LECs)生物学行为的影响及其与细胞自噬的关系有助于为后发性白内障(PCO)的预防和靶向治疗提供新的思路.目的 探讨SFN诱导人LECs凋亡的直接作用及其激发细胞自噬潮的作用机制. 方法 将离体24 h内的人供体眼行常规白内障超声乳化手术,取出的完整晶状体囊袋置于含体积分数2%胎牛血清的EMEM中培养,建立PCO囊袋模型.按照分组分别于培养基中添加0(空白对照组)、1、10和100 μmol/L SFN培养30 d,观察各组晶状体囊袋上细胞的生长情况,并采用免疫荧光技术检测细胞中F-actin和Vimentin的表达.用含5%胎牛血清的EMEM培养晶状体上皮细胞系FHL124,将培养的细胞分为空白对照组1、10、30和100 μmol/L SFN处理组,行乳酸脱氢酶(LDH)释放试验以测定各组细胞LDH释放的百分率;采用划痕试验检测各组细胞划痕面积的变化以评估细胞迁移能力;透射电子显微镜下观察各组细胞中自噬囊泡的超微结构及数量;采用Western blot法检测SFN组、SFN+3-MA组和3-MA处理的细胞自噬活动特异蛋白LC3的相对表达. 结果 各不同质量浓度SFN组晶状体囊袋上细胞覆盖率总体比较差

作者:刘含若;袁博伟;安莹;万修华

来源:中华实验眼科杂志 2017 年 35卷 3期

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作者:
刘含若;袁博伟;安莹;万修华
来源:
中华实验眼科杂志 2017 年 35卷 3期
标签:
晶状体囊 异硫氰酸 硫氰酸类/治疗作用 细胞系 晶状体上皮细胞 生物模型 自噬/药物作用 后发行白内障 Lens capsule,crystalline Isothiocyanates Thiocyanates/therapeutic use Cell line Lens epithelial cells Models,biological Autophagy/drug effects Posterior capsule opacification
背景 研究已证实莱菔硫烷(SFN)为一种有效的化学预防剂,能调控生物体不同的分子机制以抑制细胞的无序生长.自噬是人体细胞维持自身内环境的生物过程,探讨SFN对晶状体上皮细胞(LECs)生物学行为的影响及其与细胞自噬的关系有助于为后发性白内障(PCO)的预防和靶向治疗提供新的思路.目的 探讨SFN诱导人LECs凋亡的直接作用及其激发细胞自噬潮的作用机制. 方法 将离体24 h内的人供体眼行常规白内障超声乳化手术,取出的完整晶状体囊袋置于含体积分数2%胎牛血清的EMEM中培养,建立PCO囊袋模型.按照分组分别于培养基中添加0(空白对照组)、1、10和100 μmol/L SFN培养30 d,观察各组晶状体囊袋上细胞的生长情况,并采用免疫荧光技术检测细胞中F-actin和Vimentin的表达.用含5%胎牛血清的EMEM培养晶状体上皮细胞系FHL124,将培养的细胞分为空白对照组1、10、30和100 μmol/L SFN处理组,行乳酸脱氢酶(LDH)释放试验以测定各组细胞LDH释放的百分率;采用划痕试验检测各组细胞划痕面积的变化以评估细胞迁移能力;透射电子显微镜下观察各组细胞中自噬囊泡的超微结构及数量;采用Western blot法检测SFN组、SFN+3-MA组和3-MA处理的细胞自噬活动特异蛋白LC3的相对表达. 结果 各不同质量浓度SFN组晶状体囊袋上细胞覆盖率总体比较差