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目的 探讨京尼平交联羊膜作为生物支架的生物特性及可行性. 方法 获取新鲜脐带,采用贴壁法分离培养人脐带间充质干细胞(hUCMSCs).采用流式细胞技术测定细胞表面标志物PE-CD34、PE-CD45、PE-CD90、FITC-105和FITC-Oct-4单克隆抗体及鉴定细胞.取第3代hUCMSCs进行成脂、成骨诱导培养,分别用茜素红和油红O染色鉴定.无菌条件下取健康剖宫产羊膜,将修剪的组织块固定于硝酸纤维素膜并按照京尼平质量浓度、交联温度和时间的不同分为12个组,分析质量分数0.5%、1%京尼平在37℃、45℃条件下交联羊膜24、36和48 h后羊膜的最大拉伸位移和最大载荷.将hUCMSCs分为hUCMSCs组、新鲜羊膜组(孔板中铺上新鲜羊膜后加入hUCMSCs进行培养)、交联羊膜组、交联羊膜+明胶组和明胶组,分别按照分组在培养孔中铺上相应物质对hUCMSCs进行培养,采用羟脯氨酸试剂盒检测各组交联羊膜中羟脯氨酸含量.于培养后第3天采用MTT法检测各组细胞增生值(吸光度,A值)以评估交联羊膜的生物相容性. 结果 与0.5%京尼平交联羊膜相比,1%京尼平交联羊膜最大拉伸位移减小[(8.31±0.43) mm与(4.49±0.37) mm],差异有统计学意义(t=6.785,P<0.05).0.5%京尼平在37℃和45℃条件下交联24 h羊膜最大拉伸位移分别为(9.89±1.09)mm和(5.39±0.59)mm,差异有统计学

作者:尹燕锋;杨柳;涂秋芬;吕莎;管峥;苏文君;李云川;李兰

来源:中华实验眼科杂志 2018 年 36卷 2期

知识库介绍

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作者:
尹燕锋;杨柳;涂秋芬;吕莎;管峥;苏文君;李云川;李兰
来源:
中华实验眼科杂志 2018 年 36卷 2期
标签:
羊膜 交联剂/药物 应力 抗张强度 脐带间充质干细胞 生物相容性 京尼平 Amniotic membrane Cross-linking reagents/pharmacology Stress,mechanical Tensile strength Umbilical cord mesenchymal stem cells Biological compatibility Genipin
目的 探讨京尼平交联羊膜作为生物支架的生物特性及可行性. 方法 获取新鲜脐带,采用贴壁法分离培养人脐带间充质干细胞(hUCMSCs).采用流式细胞技术测定细胞表面标志物PE-CD34、PE-CD45、PE-CD90、FITC-105和FITC-Oct-4单克隆抗体及鉴定细胞.取第3代hUCMSCs进行成脂、成骨诱导培养,分别用茜素红和油红O染色鉴定.无菌条件下取健康剖宫产羊膜,将修剪的组织块固定于硝酸纤维素膜并按照京尼平质量浓度、交联温度和时间的不同分为12个组,分析质量分数0.5%、1%京尼平在37℃、45℃条件下交联羊膜24、36和48 h后羊膜的最大拉伸位移和最大载荷.将hUCMSCs分为hUCMSCs组、新鲜羊膜组(孔板中铺上新鲜羊膜后加入hUCMSCs进行培养)、交联羊膜组、交联羊膜+明胶组和明胶组,分别按照分组在培养孔中铺上相应物质对hUCMSCs进行培养,采用羟脯氨酸试剂盒检测各组交联羊膜中羟脯氨酸含量.于培养后第3天采用MTT法检测各组细胞增生值(吸光度,A值)以评估交联羊膜的生物相容性. 结果 与0.5%京尼平交联羊膜相比,1%京尼平交联羊膜最大拉伸位移减小[(8.31±0.43) mm与(4.49±0.37) mm],差异有统计学意义(t=6.785,P<0.05).0.5%京尼平在37℃和45℃条件下交联24 h羊膜最大拉伸位移分别为(9.89±1.09)mm和(5.39±0.59)mm,差异有统计学