目的 探讨星形胶质细胞活化基因-1(AEG-1)对葡萄膜黑色素瘤(UM)生物学行为的影响.方法 培养不同侵袭转移潜能的MUM-2B和MUM-2C细胞系,根据AEG-1基因序列设计出有效RNA干扰(RNAi)靶点序列及RNAi阴性对照scramble序列进行慢病毒载体的制备和病毒包装.在2株细胞系中,经AEG-1-RNAi慢病毒感染的细胞作为慢病毒感染组,空白慢病毒载体感染的细胞作为阴性对照组,未处理的细胞作为正常对照组.采用Real-time PCR、Western blot法分别检测各组细胞中AEG-1转录水平和蛋白表达水平;采用MTT法、Annexin V-APC法、细胞侵袭试验和细胞Transwell试验检测慢病毒介导AEG-1沉默对人UM细胞系生物学行为的影响.结果 成功制备RNAi慢病毒载体而进行病毒包装,然后分别转染对数生长期的MUM-2B、MUM-2C细胞系,2株细胞系中的正常对照组、阴性对照组和慢病毒感染组间细胞中AEG-1 mRNA相对表达量总体比较差异均有统计学意义(F=130.02,P＜0.01;F=144.17,P＜0.01).在MUM-2B细胞系中和MUM-2C细胞系中,染组较阴性对照组AEG-1 mRNA相对表达量分别下降约77.1％和79.8％,差异均有统计学意义(均P＜0.01);正常对照组与阴性对照组细胞中AEG-1 mRNA相对表达量比较,差异均无统计学意义(均P＞0.05).Western blot法检测结果显示,AEG-1蛋白表达水平在2
作者：毛英；白海霞；畅颖；李彬
来源：中华实验眼科杂志 2018 年 36卷 10期
