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目的 研究肝细胞生长因子(HGF)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人Tenon囊成纤维细胞增生和转分化的影响.方法 人Tenon囊成纤维细胞进行常规培养后分为空白对照组、TGF-β1处理组及不同质量浓度HGF+TGF-β1组.TGF-β1处理组在细胞培养液中添加10 μg/L TGF-β1,不同质量浓度HGF+TGF-β1组在细胞培养液中分别添加10 μg/L TGF-β1,然后分别添加不同质量浓度的HGF(25、50、100、200 μg/L),采用甲基偶氮四唑(MTT)法检测波长560 nm处各组细胞的吸光度(A560);然后选用100 μg/L的HGF进行干预,采用细胞免疫荧光染色技术检测人Tenon囊成纤维细胞中0-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达分布;采用Western blot法检测细胞中α-SMA蛋白的相对表达量. 结果 体外培养的人Tenon囊成纤维细胞呈长梭形,边界清楚,细胞中波形蛋白表达阳性并定位于细胞质.MTT检测显示空白对照组、TGF-β1处理组及HGF25μg/L +TGF-β1组、HGF50μg/L+TGF-β1组、HGF100μg/L+TGF-β1组、HGF200μg/L+TGF-β1组细胞的增生值分别为0.203±0.025、0.497±0.101、0.426±0.062、0.354±0.040、0.272±0.084和0.241±0.011,组间比较差异有统计学意义(F=9.210,P=0.003),TGF-β1处理组细胞增生值明显高于空白对照组,不同质量浓度HGF+TGF-β1组细胞增生

作者:陈静;王泳;李东豪

来源:中华实验眼科杂志 2018 年 36卷 12期

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作者:
陈静;王泳;李东豪
来源:
中华实验眼科杂志 2018 年 36卷 12期
标签:
Tenon囊/细胞学 成纤维细胞/代谢 肝细胞生长因子/应用及剂量 转化生长因子β1 纤维化/预防和控制 α-平滑肌肌动蛋白 人 培养细胞 Tenon capsule/cytology Fibroblasts/metabolism Hepatocyte growth factor/administration & dosage Transforming growth factor beta type 1 Fibrosis/prevention & control α-Smooth muscular actin Humans Cells,cultured
目的 研究肝细胞生长因子(HGF)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人Tenon囊成纤维细胞增生和转分化的影响.方法 人Tenon囊成纤维细胞进行常规培养后分为空白对照组、TGF-β1处理组及不同质量浓度HGF+TGF-β1组.TGF-β1处理组在细胞培养液中添加10 μg/L TGF-β1,不同质量浓度HGF+TGF-β1组在细胞培养液中分别添加10 μg/L TGF-β1,然后分别添加不同质量浓度的HGF(25、50、100、200 μg/L),采用甲基偶氮四唑(MTT)法检测波长560 nm处各组细胞的吸光度(A560);然后选用100 μg/L的HGF进行干预,采用细胞免疫荧光染色技术检测人Tenon囊成纤维细胞中0-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达分布;采用Western blot法检测细胞中α-SMA蛋白的相对表达量. 结果 体外培养的人Tenon囊成纤维细胞呈长梭形,边界清楚,细胞中波形蛋白表达阳性并定位于细胞质.MTT检测显示空白对照组、TGF-β1处理组及HGF25μg/L +TGF-β1组、HGF50μg/L+TGF-β1组、HGF100μg/L+TGF-β1组、HGF200μg/L+TGF-β1组细胞的增生值分别为0.203±0.025、0.497±0.101、0.426±0.062、0.354±0.040、0.272±0.084和0.241±0.011,组间比较差异有统计学意义(F=9.210,P=0.003),TGF-β1处理组细胞增生值明显高于空白对照组,不同质量浓度HGF+TGF-β1组细胞增生