目的:探讨DKK1(Dickkopf1)通过Wnt/β-catenin信号通路对人晶状体上皮细胞(LECs)增生的影响及其可能的作用机制，为晶状体后囊膜混浊(PCO)的临床治疗提供新靶点。方法:将人LECs系(SRA 01/04细胞)分为Wnt3a过表达组、DKK1组和对照组。Wnt3a过表达组采用脂质体介导转染技术将Wnt3a cDNA表达载体瞬时转染入人SRA 01/04细胞构建PCO模型。DKK1组转染Wnt3a cDNA表达载体后48 h在培养基中加入100 μg/ml DKK1进行干预，对照组细胞转染pcDNA3-HA表达载体。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测各组细胞生存率；采用免疫细胞化学法检测各组细胞增生细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达；采用Western blot法检各组细胞中Wnt3a、CyclinD1和C-Myc蛋白的表达；采用免疫荧光技术法检测并定位各组细胞中β-catenin的表达。结果:Western blot检测发现，Wnt3a过表达组Wnt3a蛋白的相对表达量为0.84±0.06，高于对照组的0.49±0.07，差异有统计学意义( t＝3.704， P<0.05)。CCK-8试验显示，不同时间点各组细胞生存率总体比较差异均有统计学意义( F分组＝10.910， P<0.05； F时间＝6.041， P<0.05)，其中Wnt3a过表达组细胞生存率明显高于对照组，DKK1组细胞生存率明显低于Wnt3a过表达组，差异均有

作者：张利民；包秀丽

来源：中华实验眼科杂志 2020 年 38卷 4期