目的:探讨压力对与兔视网膜神经节细胞(RGCs)共培养的视网膜干细胞(RSCs)分化的影响。方法:选取SPF级新西兰孕22 d兔，取出胚胎，获取视网膜睫状缘色素上皮组织，培养原代RSCs。选取SPF级新生新西兰大白兔6只，分离视网膜神经上皮层组织，培养原代RGCs。采用巢蛋白(Nestin)抗体免疫荧光染色法、溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)流式细胞术分析、RSCs自发分化细胞免疫荧光检测及流式细胞术分析鉴定体外培养的兔RSCs，采用免疫荧光染色法以Brn3b抗体及Thy1.1抗体鉴定RGCs；将RGCs和RSCs分别放在Transwell的上下层培养，构建共培养体系。分别采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测0、20、40、60、80 mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa)压力条件下室RSCs及分化所得细胞的Nestin和Thy1.1 mRNA和蛋白表达变化。结果:体外培养的兔RSCs特异性标志物Nestin抗体染色阳性；BrdU流式细胞术分析结果显示，BrdU阳性细胞占分离RSCs细胞的(92.26±3.28)
作者：戴敏；亢泽峰；胡竹林；李妍
来源：中华实验眼科杂志 2022 年 40卷 12期
