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目的:研究虾青素对过氧化氢(H 2O 2)诱导晶状体上皮细胞HLEB-3氧化应激损伤的调控作用及其可能的作用机制。 方法:将HLEB-3细胞于不同浓度H 2O 2(0、50、100、200、500、750 μmol/L)下培养,噻唑蓝(MTT)法检测细胞抑制率,计算半数抑制浓度(IC50)。将HLEB-3细胞使用不同浓度(0、5、10、20、50 μmol/L)虾青素培养,MTT法检测细胞存活率。将HLEB-3细胞分为4个组,其中正常对照组用完全培养基培养、氧化应激组于250 μmol/L H 2O 2培养基中培养,10 μmol/L虾青素组和20 μmol/L虾青素组分别于相应浓度虾青素+250 μmol/L H 2O 2培养基中培养,各组均培养24 h。采用流式细胞仪检测细胞凋亡率;采用ELISA法检测细胞一氧化氮(NO)浓度、超氧化物歧化酶(SOD)活性、还原型谷胱甘肽(GSH)活性和丙二醛(MDA)含量;采用Western bolt法检测细胞核核因子E2相关因子2(Nrf2)、细胞质Nrf2和血红素加氧酶-1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白表达。另将细胞分为正常对照-小干扰RNA(NC-siRNA)组、Nrf2-siRNA组、NC-siRNA+虾青素组和Nrf2-siRNA+虾青素组,分别转染NC-siRNA或Nrf2-siRNA,转染后24 h分别于含0或10 μmol/L虾青素和250 μmol/L H 2O 2培养

作者:李勇;刘钊臣;彭华琮

来源:中华实验眼科杂志 2023 年 41卷 5期

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作者:
李勇;刘钊臣;彭华琮
来源:
中华实验眼科杂志 2023 年 41卷 5期
标签:
晶状体上皮细胞 虾青素 氧化应激 Nrf2信号通路 Lens epithelial cells Astaxanthin Oxidative stress Nrf2 signaling pathway
目的:研究虾青素对过氧化氢(H 2O 2)诱导晶状体上皮细胞HLEB-3氧化应激损伤的调控作用及其可能的作用机制。 方法:将HLEB-3细胞于不同浓度H 2O 2(0、50、100、200、500、750 μmol/L)下培养,噻唑蓝(MTT)法检测细胞抑制率,计算半数抑制浓度(IC50)。将HLEB-3细胞使用不同浓度(0、5、10、20、50 μmol/L)虾青素培养,MTT法检测细胞存活率。将HLEB-3细胞分为4个组,其中正常对照组用完全培养基培养、氧化应激组于250 μmol/L H 2O 2培养基中培养,10 μmol/L虾青素组和20 μmol/L虾青素组分别于相应浓度虾青素+250 μmol/L H 2O 2培养基中培养,各组均培养24 h。采用流式细胞仪检测细胞凋亡率;采用ELISA法检测细胞一氧化氮(NO)浓度、超氧化物歧化酶(SOD)活性、还原型谷胱甘肽(GSH)活性和丙二醛(MDA)含量;采用Western bolt法检测细胞核核因子E2相关因子2(Nrf2)、细胞质Nrf2和血红素加氧酶-1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白表达。另将细胞分为正常对照-小干扰RNA(NC-siRNA)组、Nrf2-siRNA组、NC-siRNA+虾青素组和Nrf2-siRNA+虾青素组,分别转染NC-siRNA或Nrf2-siRNA,转染后24 h分别于含0或10 μmol/L虾青素和250 μmol/L H 2O 2培养