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目的:探究miR-25在成骨细胞分化过程中的作用及其作用机制。方法β-甘油磷酸(β-glycerophos-phate,β-GP)和抗坏血酸( ascorbic acid)诱导成骨细胞矿化,茜素红( Alizarin Red S)染色实验观察成骨细胞的矿化情况。生物信息学运算预测miR-25的靶基因。实时定量PCR法检测miR-25以及其他相关基因的表达。过表达实验和抑制实验用于研究miR-25在成骨细胞分化中的作用及其与靶基因之间的相互关系。荧光素酶报告基因实验验证miR-25与其靶基因之间的结合。结果 miR-25的表达随成骨分化过程而逐渐升高。过表达miR-25通过转录后调控其靶基因TWIST1的表达来促进成骨分化。作为调控成骨细胞分化的的转录因子,扭曲基础螺旋—环—螺旋蛋白1( TWIST1)是miR-25的靶基因。结论 miR-125通过作用于靶基因 TWIST1在成骨细胞的分化中发挥了重要的调控作用,表明调控miR-25的表达,可能成为骨代谢疾病新的治疗靶点。

作者:杨丽;赵新兰;唐卓;陈凯;秦爱平

来源:疑难病杂志 2015 年 11期

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作者:
杨丽;赵新兰;唐卓;陈凯;秦爱平
来源:
疑难病杂志 2015 年 11期
标签:
microRNA 成骨细胞分化 转录因子 靶基因 microRNA Osteoblast differentiation Transcription factor Target gene
目的:探究miR-25在成骨细胞分化过程中的作用及其作用机制。方法β-甘油磷酸(β-glycerophos-phate,β-GP)和抗坏血酸( ascorbic acid)诱导成骨细胞矿化,茜素红( Alizarin Red S)染色实验观察成骨细胞的矿化情况。生物信息学运算预测miR-25的靶基因。实时定量PCR法检测miR-25以及其他相关基因的表达。过表达实验和抑制实验用于研究miR-25在成骨细胞分化中的作用及其与靶基因之间的相互关系。荧光素酶报告基因实验验证miR-25与其靶基因之间的结合。结果 miR-25的表达随成骨分化过程而逐渐升高。过表达miR-25通过转录后调控其靶基因TWIST1的表达来促进成骨分化。作为调控成骨细胞分化的的转录因子,扭曲基础螺旋—环—螺旋蛋白1( TWIST1)是miR-25的靶基因。结论 miR-125通过作用于靶基因 TWIST1在成骨细胞的分化中发挥了重要的调控作用,表明调控miR-25的表达,可能成为骨代谢疾病新的治疗靶点。