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目的 观察在大鼠糖尿病视网膜病变(DR)模型中骨髓内皮祖细胞(EPCs)功能变化,探讨EPCs在DR发病机制中的作用.方法 实验研究.雄性成年Wistar大鼠50只,以随机数字表法,随机分为正常对照(CON)组(14只鼠)和糖尿病(DM)组(36只鼠).根据病程,将DM组大鼠再分为糖尿病1个月(DM1)组、糖尿病3个月(DM3)组、糖尿病6个月(DM6)组,每组各12只.采用密度梯度离心法从各组大鼠骨髓获取单核细胞,将其接种于纤维连接蛋白包被的培养板;培养7d后,利用Dil-acLDL和FITC-UEA-I细胞荧光染色法及流式细胞仪CD34和CD133抗体标记法鉴定EPCs.在倒置相差显微镜下对EPCs计数克隆形成单位(CFU),以评估骨髓EPCs的数量水平;采用MTT比色法、Transwell小室和黏附能力测定实验观察EPCs的增殖、迁移和黏附能力.同时于各相应时间点摘除大鼠眼球行苏木精-伊红(HE)染色,采用免疫组织化学法分析血管内皮生长因子(VEGF)在大鼠视网膜中的表达.对比分析EPCs的数量和功能变化及其与DR形态学变化的相互关系.组间骨髓EPCs数量、功能及视网膜VEGF表达阳性率比较,采用单因素方差分析和LSD-t检验法.结果 DM1、DM3、DM6组大鼠骨髓来源EPCs-CFU为(9.6±1.8,11.5±2.5,14.0±2.4个/×200倍视野)较CON组(16.6±2.7个/×200倍视野)减少,差异有统计学意义(F=13.311,P

作者:张惟;韩琪;陈松;颜华

来源:中华眼视光学与视觉科学杂志 2013 年 15卷 2期

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作者:
张惟;韩琪;陈松;颜华
来源:
中华眼视光学与视觉科学杂志 2013 年 15卷 2期
标签:
糖尿病视网膜病变 内皮祖细胞 细胞培养 Diabetic retinopathy Endothelial progenitor cells Cell culture
目的 观察在大鼠糖尿病视网膜病变(DR)模型中骨髓内皮祖细胞(EPCs)功能变化,探讨EPCs在DR发病机制中的作用.方法 实验研究.雄性成年Wistar大鼠50只,以随机数字表法,随机分为正常对照(CON)组(14只鼠)和糖尿病(DM)组(36只鼠).根据病程,将DM组大鼠再分为糖尿病1个月(DM1)组、糖尿病3个月(DM3)组、糖尿病6个月(DM6)组,每组各12只.采用密度梯度离心法从各组大鼠骨髓获取单核细胞,将其接种于纤维连接蛋白包被的培养板;培养7d后,利用Dil-acLDL和FITC-UEA-I细胞荧光染色法及流式细胞仪CD34和CD133抗体标记法鉴定EPCs.在倒置相差显微镜下对EPCs计数克隆形成单位(CFU),以评估骨髓EPCs的数量水平;采用MTT比色法、Transwell小室和黏附能力测定实验观察EPCs的增殖、迁移和黏附能力.同时于各相应时间点摘除大鼠眼球行苏木精-伊红(HE)染色,采用免疫组织化学法分析血管内皮生长因子(VEGF)在大鼠视网膜中的表达.对比分析EPCs的数量和功能变化及其与DR形态学变化的相互关系.组间骨髓EPCs数量、功能及视网膜VEGF表达阳性率比较,采用单因素方差分析和LSD-t检验法.结果 DM1、DM3、DM6组大鼠骨髓来源EPCs-CFU为(9.6±1.8,11.5±2.5,14.0±2.4个/×200倍视野)较CON组(16.6±2.7个/×200倍视野)减少,差异有统计学意义(F=13.311,P