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目的::研究microRNA-135a/b(miR-135a/b)对葡萄膜黑色素瘤(UM)细胞迁移能力的调控作用及其机制。方法::实验研究。采用定量RT-PCR检测UM标本和癌旁组织中miR-135a/b的表达水平。将miRNA模拟物转染入UM细胞(M23和SP6.5)过表达miR-135a/b,转染无义序列作为对照组(NC)。利用小RNA干扰技术和慢病毒过表达载体感染技术分别下调和上调细胞中SIRT1蛋白表达水平,分别以无义小干扰RNA(siNC)和插入无义序列的慢病毒载体(Lv-NC)作为阴性对照。采用划痕实验和Transwell实验检测细胞的迁移能力。双萤光素酶报告实验用于鉴定miR-135a/b的靶基因。Western blot检测SIRT1蛋白的表达水平。采用独立样本 t检验进行数据分析。 结果::定量RT-PCR结果显示miR-135a/b在UM组织较癌旁组织的表达水平明显下调(miR-135a: t=6.38, P=0.003;miR-135b: t=23.26, P<0.001)。划痕实验和Transwell实验结果显示,与NC组相比,miR-135a/b过表达M23和SP6.5细胞迁移距离减小(miR-135a: t=36.01、8.98,均 P<0.01;miR-135b: t=27.53、10.51,均 P<0.01)且迁移细胞数量减少(miR-135a: t=7.04、7.02,均 P<0.01;miR-135b: t=5.0

作者:林永;杨汝森;叶菊秀;陈晓燕

来源:中华眼视光学与视觉科学杂志 2023 年 25卷 2期

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作者:
林永;杨汝森;叶菊秀;陈晓燕
来源:
中华眼视光学与视觉科学杂志 2023 年 25卷 2期
标签:
葡萄膜恶性黑色素瘤 microRNA-135a microRNA-135b SIRT1 细胞迁移 uveal malignant melanoma microRNA-135a microRNA-135b SIRT1 cells migration
目的::研究microRNA-135a/b(miR-135a/b)对葡萄膜黑色素瘤(UM)细胞迁移能力的调控作用及其机制。方法::实验研究。采用定量RT-PCR检测UM标本和癌旁组织中miR-135a/b的表达水平。将miRNA模拟物转染入UM细胞(M23和SP6.5)过表达miR-135a/b,转染无义序列作为对照组(NC)。利用小RNA干扰技术和慢病毒过表达载体感染技术分别下调和上调细胞中SIRT1蛋白表达水平,分别以无义小干扰RNA(siNC)和插入无义序列的慢病毒载体(Lv-NC)作为阴性对照。采用划痕实验和Transwell实验检测细胞的迁移能力。双萤光素酶报告实验用于鉴定miR-135a/b的靶基因。Western blot检测SIRT1蛋白的表达水平。采用独立样本 t检验进行数据分析。 结果::定量RT-PCR结果显示miR-135a/b在UM组织较癌旁组织的表达水平明显下调(miR-135a: t=6.38, P=0.003;miR-135b: t=23.26, P<0.001)。划痕实验和Transwell实验结果显示,与NC组相比,miR-135a/b过表达M23和SP6.5细胞迁移距离减小(miR-135a: t=36.01、8.98,均 P<0.01;miR-135b: t=27.53、10.51,均 P<0.01)且迁移细胞数量减少(miR-135a: t=7.04、7.02,均 P<0.01;miR-135b: t=5.0