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目的 研究Smad7反义寡核苷酸(ASODN)转染后人胰腺癌SW1990细胞基质金属蛋白酶-2(M MP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)表达及细胞增殖的变化,探讨Smad7在胰腺癌发生、发展中的作用机制.方法 经脂质体介导将Smad7 ASODN转染人胰腺癌细胞株SW1990.以无义寡核苷酸( NSODN)转染、单加ASODN、单加脂质体作为对照.荧光显微镜及流式细胞仪检测转染效率;RT-PCR、蛋白质印迹法检测转染细胞Smad7、MMP-2和TIMP-2表达;噻唑蓝(MTT)比色法检测转染细胞的增殖.结果 Smad7 ASODN转染SW1990细胞的转染效率为81.2%,转染24h后,转染组、ASODN组和脂质体组细胞Smad7 mRNA表达量分别为0.34±0.06、0.95 ±0.07、1.03 ±0.11;MMP-2mRNA表达量为0.54 ±0.08、1.15 ±0.13、1.27 ±0.16;TIMP-2 mRNA表达量为0.26±0.07、0.72±0.13、0.78±0.17;Smad7蛋白表达量为0.14±0.03、0.29 ±0.05、0.28±0.07;MMP-2蛋白表达量为0.17±0.02、0.29±0.05、0.31±0.04;TIMP-2蛋白表达量为0.20±0.03、0.41±0.11、0.43±0.09.转染组均较其他各组的表达显著减少(P值均<0.01).转染组、ASODN组、脂质体组细胞的增殖活性分别为0.83 ±0.03、1.02±0.02、0.99±0.02,转染组细胞的增殖活性较其他各组显著被抑制(P值均<0.01).

作者:于鸿;黄俊星;王朝夫;施达仁

来源:中华胰腺病杂志 2012 年 12卷 1期

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作者:
于鸿;黄俊星;王朝夫;施达仁
来源:
中华胰腺病杂志 2012 年 12卷 1期
标签:
胰腺肿瘤 Smad7 反义寡核苷酸 基质金属蛋白酶-2 基质金属蛋白酶组织抑制因子-2 细胞增殖 Pancreatic neoplasms Smad7 Antisense oligodeoxynucleotide Matrix metalloproteinase-2 Tissue inhibitor of metalloproteinase-2 Cell proliferation
目的 研究Smad7反义寡核苷酸(ASODN)转染后人胰腺癌SW1990细胞基质金属蛋白酶-2(M MP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)表达及细胞增殖的变化,探讨Smad7在胰腺癌发生、发展中的作用机制.方法 经脂质体介导将Smad7 ASODN转染人胰腺癌细胞株SW1990.以无义寡核苷酸( NSODN)转染、单加ASODN、单加脂质体作为对照.荧光显微镜及流式细胞仪检测转染效率;RT-PCR、蛋白质印迹法检测转染细胞Smad7、MMP-2和TIMP-2表达;噻唑蓝(MTT)比色法检测转染细胞的增殖.结果 Smad7 ASODN转染SW1990细胞的转染效率为81.2%,转染24h后,转染组、ASODN组和脂质体组细胞Smad7 mRNA表达量分别为0.34±0.06、0.95 ±0.07、1.03 ±0.11;MMP-2mRNA表达量为0.54 ±0.08、1.15 ±0.13、1.27 ±0.16;TIMP-2 mRNA表达量为0.26±0.07、0.72±0.13、0.78±0.17;Smad7蛋白表达量为0.14±0.03、0.29 ±0.05、0.28±0.07;MMP-2蛋白表达量为0.17±0.02、0.29±0.05、0.31±0.04;TIMP-2蛋白表达量为0.20±0.03、0.41±0.11、0.43±0.09.转染组均较其他各组的表达显著减少(P值均<0.01).转染组、ASODN组、脂质体组细胞的增殖活性分别为0.83 ±0.03、1.02±0.02、0.99±0.02,转染组细胞的增殖活性较其他各组显著被抑制(P值均<0.01).