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目的 观察Toll样受体4(TLR4)与胰腺癌PANC1细胞对吉西他滨(GEM)敏感性的关系,探讨其相关机制.方法 将PANC1细胞分为GEM组、脂多糖(LPS)+ GEM组、TLR4-siRNA+ GEM组.GEM组给予GEM处理,LPS+ GEM组先用1 mg/L的LPS干预4h后再用GEM处理,TLR4-siRNA+GEM组先用100 pmol/ml TLR4-siRNA转染细胞4h后再用GEM处理.以不做任何处理的细胞作为对照组.采用MTT法检测各组细胞的增殖,Hoechst33258染色观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测细胞TLR4、磷酸化AKT (p-AKT)、活性Caspase-3蛋白表达.结果 GEM组、LPS+ GEM组、TLR4-siRNA+ GEM组GEM对PANC1细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为(8.90±0.62)、(14.21±0.95)、(3.96±0.27) mg/L,LPS+ GEM组显著高于GEM组,TLR4-siRNA+ GEM组显著低于GEM组,差异均有统计学意义(P值均<0.01).LPS+ GEM组典型凋亡形态学改变的细胞数较GEM组减少,而TLR4-siRNA+ GEM组则较GEM组增多;对照组、GEM组、LPS+ GEM组、TLR4-siRNA+ GEM组细胞凋亡率分别为(2.1±0.3)%、(15.1±2.3)%、(9.8±1.5)%、(22.9±3.1)%,LPS+GEM组显著低于GEM组,TLR4-siRNA+GEM组显著高于GEM组,差异均有统计学意义(P值均<0.01).4组的TLR4表达量分别为0.83±0.08、0.81±0.07、0.85±0.07、0.16

作者:孙运良;虞阳;童依丽;吴洪玉;马建霞

来源:中华胰腺病杂志 2016 年 16卷 4期

知识库介绍

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作者:
孙运良;虞阳;童依丽;吴洪玉;马建霞
来源:
中华胰腺病杂志 2016 年 16卷 4期
标签:
胰腺肿瘤 Toll样受体4 抗药性,肿瘤 吉西他滨 磷酸化AKT 活性Caspase-3 Pancreatic neoplasms Toll-like receptor 4 Drug resistance,neoplasm Gemcitabine Phosphorylated AKT Activated Caspase-3
目的 观察Toll样受体4(TLR4)与胰腺癌PANC1细胞对吉西他滨(GEM)敏感性的关系,探讨其相关机制.方法 将PANC1细胞分为GEM组、脂多糖(LPS)+ GEM组、TLR4-siRNA+ GEM组.GEM组给予GEM处理,LPS+ GEM组先用1 mg/L的LPS干预4h后再用GEM处理,TLR4-siRNA+GEM组先用100 pmol/ml TLR4-siRNA转染细胞4h后再用GEM处理.以不做任何处理的细胞作为对照组.采用MTT法检测各组细胞的增殖,Hoechst33258染色观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测细胞TLR4、磷酸化AKT (p-AKT)、活性Caspase-3蛋白表达.结果 GEM组、LPS+ GEM组、TLR4-siRNA+ GEM组GEM对PANC1细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为(8.90±0.62)、(14.21±0.95)、(3.96±0.27) mg/L,LPS+ GEM组显著高于GEM组,TLR4-siRNA+ GEM组显著低于GEM组,差异均有统计学意义(P值均<0.01).LPS+ GEM组典型凋亡形态学改变的细胞数较GEM组减少,而TLR4-siRNA+ GEM组则较GEM组增多;对照组、GEM组、LPS+ GEM组、TLR4-siRNA+ GEM组细胞凋亡率分别为(2.1±0.3)%、(15.1±2.3)%、(9.8±1.5)%、(22.9±3.1)%,LPS+GEM组显著低于GEM组,TLR4-siRNA+GEM组显著高于GEM组,差异均有统计学意义(P值均<0.01).4组的TLR4表达量分别为0.83±0.08、0.81±0.07、0.85±0.07、0.16